生物有機(jī)肥產(chǎn)品生產(chǎn)菌種使用現(xiàn)狀

細(xì)菌類生產(chǎn)用菌種除常見的芽孢外， 還出現(xiàn)了高地芽孢菌、 類干酪乳菌、 屎腸球菌、 鹽居固氮菌等新菌種， 其中， 高地芽孢菌和鹽居固氮菌普遍存在于土壤環(huán)境中， 未見致病性報(bào)道， 屬風(fēng)險(xiǎn)一級； 類干酪乳菌又名為副干酪乳菌， 雖為風(fēng)險(xiǎn)一級 ， 但有從動(dòng)物受傷部位分離到該菌的報(bào)道；屎腸球菌屬于乳酸菌類，屬風(fēng)險(xiǎn)二級， 建議謹(jǐn)慎使用。伯克霍爾德氏菌是一些具有生物防治、 促進(jìn)植物生長和生物修復(fù)等功能的細(xì)菌， 但同時(shí)也是可以引起鼻疽、 類鼻疽病的致病菌， 因此真菌伯克霍爾德氏菌屬于風(fēng)險(xiǎn)三級， 需做致病性試驗(yàn)， 建議慎用或不用。真菌類生產(chǎn)用菌株主要為絲狀真菌和酵母菌。哈茨木霉、 米曲霉、 淡紫紫孢菌、 長枝木霉、 綠色木霉、 棘孢木霉、 黑曲霉、 粉紅螺旋聚孢霉、 金龜子綠僵菌等屬于生物安全風(fēng)險(xiǎn)等級二級， 需按照NY/T 1109－2017 《微生物肥料生物安全通用技術(shù)準(zhǔn)則》 進(jìn)行毒理學(xué)測試。酵母菌主要以釀酒酵母為主， 還有少量東方伊薩酵母、杰丁塞伯林德納氏酵母 （原產(chǎn)朊假絲酵母、 杰丁畢赤酵母）、 膜醭畢赤酵母、 解脂耶羅威亞酵母等， 屬于生物安全風(fēng)險(xiǎn)等級一級， 可免做毒理學(xué)試驗(yàn)。

                                                          低溫生物菌種的制備是什么？

將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液，接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上，于25～28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產(chǎn)上延續(xù)使用半年左右。放線孢子的培養(yǎng)基大多是采用麩皮或豌豆浸出液、牛肉膏及無機(jī)鹽與瓊脂制成的。將斜面孢子接入擴(kuò)大的扁瓶孢子培養(yǎng)基中,于28～37℃培養(yǎng)5～14天。所獲得的大量孢子可直接作為種子罐 (6)的種子。如果有些生產(chǎn)菌種不產(chǎn)孢子，如赤霉產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的,則可采用搖瓶（5）液體培養(yǎng)制得菌絲體，作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米漿等）,及無機(jī)鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐(7)的種子應(yīng)是生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯,無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%～20%。

低溫生物菌種的冷凍干燥保藏法

(1)準(zhǔn)備安瓿管用于冷凍干燥菌種保藏的安瓿管宜采用中性玻璃制造，形狀可用長頸球形底的，亦稱淚滴型安瓿管(圖Ⅶ-15)，大小要求外徑6-7.5mm，長105mm，球部直徑9-11mm，壁厚0.6-1.2mm。也可用沒有球部的管狀安瓿管。塞好棉塞，1.05kg/cm2>，121.3℃滅菌30分鐘，備用。

(2)準(zhǔn)備菌種，用冷凍干燥法保藏的菌種，其保藏期可達(dá)數(shù)年至十?dāng)?shù)年，為了在許多年后不出差錯(cuò)，故所用菌種要特別注意其純度，即不能有雜菌污染，然后在適培養(yǎng)基中用適溫度培養(yǎng)，使培養(yǎng)出良好的培養(yǎng)物。細(xì)菌和酵母的菌齡要求超過對數(shù)生長期，若用對數(shù)生長期的菌種進(jìn)行保藏，其存活率反而降低。一般，細(xì)菌要求24-48小時(shí)的培養(yǎng)物;酵母需培養(yǎng)3天;形成孢子的微生物則宜保存孢子;線菌與絲狀真菌則培養(yǎng)7-10天。

(3)制備菌懸液與分裝以細(xì)菌斜面為例，用脫脂牛乳2ml左右加入斜面試管中，制成濃菌液，每支安瓿管分裝0.2ml。

(4)冷凍冷凍干燥器有成套的裝置出售，價(jià)值昂貴，此處介紹的是簡易方法與裝置，可達(dá)到同樣的目的。

將分裝好的安瓿管放低溫冰箱中冷凍，無低溫冰箱可用冷凍劑如干冰(固體CO2>)酒精的液或干冰酮液，溫度可達(dá)-70℃。將安瓿管插入冷凍劑，只需冷凍4-5分鐘，即可使懸液結(jié)冰。

低溫生物菌種的菌劑用法

微生物菌劑用量少，主要起調(diào)節(jié)作用。微生物菌劑的使用原則是“早，近，勻”使用時(shí)間早，離作物根系近，施用均勻。

⑴ 噴施 液體微生物菌劑含有固氮菌，光合細(xì)菌等微生物，可以用作葉面噴施，給植物增加營養(yǎng)，促進(jìn)光合作用。我們公司的微生物菌劑不適合作葉面噴施，因?yàn)橹饕煞质嵌喾N芽孢菌復(fù)合而成的。

⑵ 拌種 將種子放入清水中浸濕后撈出控干，隨后將本品揚(yáng)撒在種子上、混拌均勻，陰干后播種。使用種衣劑的種子應(yīng)拌種衣劑，后拌本品，陰干后播種，隨拌隨播。這種方法適合各種糧食種子。能促進(jìn)種子生長，減少病蟲害。

⑶ 浸種 菌劑：水以1：2的比例混合，攪拌后把種子放入菌液中，攪拌浸泡8—12小時(shí)，撈出陰干后播種。提高種子發(fā)芽率，增強(qiáng)抗病能力。

⑷ 蘸根 對于移栽作物，將本品兌適量水，蘸根后移栽即可。適用于有根的作物，在移栽時(shí)使用比較好。

⑸ 拌根 微生物菌劑可以和農(nóng)家有機(jī)肥混合，有機(jī)肥必須先充分腐熟后才能使用，否則會(huì)殺掉菌劑中的微生物。當(dāng)作種肥或底肥時(shí)，可將本品與化肥或有機(jī)肥拌在一起，隨肥料一起施用，須隨拌隨用，以免造成肥料融化而影響播肥質(zhì)量。