低溫生物菌種的改良制備

即采用遺傳育種的方法，使菌株(從自然界分離篩選而得的出發(fā)菌株)的遺傳因子 DNA發(fā)生突變、重組，從而從中選出產(chǎn)量高、成品質(zhì)量好或具有新的培養(yǎng)特性如耐產(chǎn)物抑制、能利用廉價(jià)原料以及具有生產(chǎn)新品種能力的優(yōu)良菌種。采用的方法有誘變育種、雜交育種、細(xì)胞融合技術(shù)和重組DNA技術(shù)。誘變育種是利用誘變因子如紫外線、鈷-60、乙烯類等物理或化學(xué)誘變劑處理生產(chǎn)菌株的單孢子懸浮液，以獲得誘發(fā)突變株。隨后進(jìn)行突變株的篩選，從中篩選高產(chǎn)菌株。由于隨機(jī)的突變?nèi)后w中，有益突變所占比例很低，要獲得高產(chǎn)突變株必須進(jìn)行大量篩選?？筛鶕?jù)生物合成途徑中的反應(yīng)點(diǎn),并通過它們的改變以提高產(chǎn)率或其他特性，如選育抗產(chǎn)物反饋抑制的突變株、增加細(xì)胞透性的突變株及營養(yǎng)缺陷型的突變株等。這種"理性篩選法"廣泛應(yīng)用于氨基酸產(chǎn)生菌的選育。

低溫生物菌種的冷凍干燥保藏法

(1)準(zhǔn)備安瓿管用于冷凍干燥菌種保藏的安瓿管宜采用中性玻璃制造，形狀可用長頸球形底的，亦稱淚滴型安瓿管(圖Ⅶ-15)，大小要求外徑6-7.5mm，長105mm，球部直徑9-11mm，壁厚0.6-1.2mm。也可用沒有球部的管狀安瓿管。塞好棉塞，1.05kg/cm2>，121.3℃滅菌30分鐘，備用。

(2)準(zhǔn)備菌種，用冷凍干燥法保藏的菌種，其保藏期可達(dá)數(shù)年至十?dāng)?shù)年，為了在許多年后不出差錯(cuò)，故所用菌種要特別注意其純度，即不能有雜菌污染，然后在適培養(yǎng)基中用適溫度培養(yǎng)，使培養(yǎng)出良好的培養(yǎng)物。細(xì)菌和酵母的菌齡要求超過對(duì)數(shù)生長期，若用對(duì)數(shù)生長期的菌種進(jìn)行保藏，其存活率反而降低。一般，細(xì)菌要求24-48小時(shí)的培養(yǎng)物;酵母需培養(yǎng)3天;形成孢子的微生物則宜保存孢子;線菌與絲狀真菌則培養(yǎng)7-10天。

(3)制備菌懸液與分裝以細(xì)菌斜面為例，用脫脂牛乳2ml左右加入斜面試管中，制成濃菌液，每支安瓿管分裝0.2ml。

(4)冷凍冷凍干燥器有成套的裝置出售，價(jià)值昂貴，此處介紹的是簡(jiǎn)易方法與裝置，可達(dá)到同樣的目的。

將分裝好的安瓿管放低溫冰箱中冷凍，無低溫冰箱可用冷凍劑如干冰(固體CO2>)酒精的液或干冰酮液，溫度可達(dá)-70℃。將安瓿管插入冷凍劑，只需冷凍4-5分鐘，即可使懸液結(jié)冰。

低溫生物菌種的菌劑用法

微生物菌劑用量少，主要起調(diào)節(jié)作用。微生物菌劑的使用原則是“早，近，勻”使用時(shí)間早，離作物根系近，施用均勻。

⑴ 噴施 液體微生物菌劑含有固氮菌，光合細(xì)菌等微生物，可以用作葉面噴施，給植物增加營養(yǎng)，促進(jìn)光合作用。我們公司的微生物菌劑不適合作葉面噴施，因?yàn)橹饕煞质嵌喾N芽孢菌復(fù)合而成的。

⑵ 拌種 將種子放入清水中浸濕后撈出控干，隨后將本品揚(yáng)撒在種子上、混拌均勻，陰干后播種。使用種衣劑的種子應(yīng)拌種衣劑，后拌本品，陰干后播種，隨拌隨播。這種方法適合各種糧食種子。能促進(jìn)種子生長，減少病蟲害。

⑶ 浸種 菌劑：水以1：2的比例混合，攪拌后把種子放入菌液中，攪拌浸泡8—12小時(shí)，撈出陰干后播種。提高種子發(fā)芽率，增強(qiáng)抗病能力。

⑷ 蘸根 對(duì)于移栽作物，將本品兌適量水，蘸根后移栽即可。適用于有根的作物，在移栽時(shí)使用比較好。

⑸ 拌根 微生物菌劑可以和農(nóng)家有機(jī)肥混合，有機(jī)肥必須先充分腐熟后才能使用，否則會(huì)殺掉菌劑中的微生物。當(dāng)作種肥或底肥時(shí)，可將本品與化肥或有機(jī)肥拌在一起，隨肥料一起施用，須隨拌隨用，以免造成肥料融化而影響播肥質(zhì)量。