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做親和柱時(shí),使用Sepharose 4B 和 Sepharose CL-4B有何不同?
Sepharose 4B指4%的瓊脂糖
Sepharose CL-4B指4%高度鉸鏈的瓊脂糖
他們的區(qū)別在于鉸鏈程度不一樣,在親和層析色譜中,介質(zhì)鉸鏈程度越高,化學(xué)穩(wěn)定性就應(yīng)該越高。這樣就可以耐受更加苛刻條件洗脫而偶聯(lián)的配基不會(huì)脫落。越是硬質(zhì)的介質(zhì),耐受的流速也會(huì)越高。這樣更節(jié)省平衡洗脫的時(shí)間。
親和柱介紹
目前,于黃曲霉毒素分離純化的固相萃取產(chǎn)品有兩類:
二是多功能凈化柱(MFC)它是一種特殊的SPE柱,以極性、非極性及離子交換等兒類基團(tuán)組成填充劑,可選擇性吸附樣液中的脂類、蛋白類等雜質(zhì),AFT不被吸附而直接通過(guò),MFC的操作更為簡(jiǎn)便,不需要進(jìn)行活化、淋洗和洗脫操作只需直接上樣,10秒鐘內(nèi)即可完成整個(gè)凈化過(guò)程,凈化效果理想。
親和柱的應(yīng)用
親和層析(Immunoaffinity Chromatography,IAC)提供了一個(gè)有效的方法,從液體材料中進(jìn)行選擇凈化、化合物濃縮、分類,然后從相支持物中提取純化樣本。20世紀(jì)60年代末瓊脂糖載體開(kāi)始(Axen等,1967),IAC成為化學(xué)中有效分離手段之一。
Van等(1987)應(yīng)用IAC技術(shù)凈化了豬肉中的氯隨后1989年又在此技術(shù)基礎(chǔ)上測(cè)定了蛋、牛奶(Van,1989)中的氯。其現(xiàn)在已成為醫(yī)類、獸藥、食品檢測(cè)中,前處理方法應(yīng)用的重要手段。