低溫生物菌種——篩選模型

根據不同的篩選目的，采用不同的篩選模型。如常規(guī)篩選產生菌的方法是將土壤中分離所得的純種，在含有瓊脂培養(yǎng)基的平皿上培養(yǎng)后，用打孔器將菌塊移至含有試驗菌的瓊脂培養(yǎng)基上，在適宜的溫度下培養(yǎng)一定時間后取出，如在菌塊的周圍有透明的抑菌圈，則表明此菌種具有產生抑制試驗菌生長的抑菌物質的能力。所得菌種經過搖瓶液體發(fā)酵，選出生產能力高的菌種。另一方面對所提取的進行結構分析、藥理試驗及臨床試驗等，確為有效者，即可作為生產菌種。又如篩選脂肪酶生產菌種的方法是將分離所得的霉菌涂布于含有牛脂的瓊脂培養(yǎng)基上，恒溫培養(yǎng)一定時間，如菌落周圍出現透明圈的，則該菌具有分解脂肪的能力，進一步作搖瓶發(fā)酵測定酶活力，挑選產量高者作生產菌種的出發(fā)菌株。

生物有機肥產品生產安全性分析

雖然目前生物有機肥產品生產大多采用植物根際促生菌， 但近年來很多研究發(fā)現，芽孢菌屬和類芽孢菌個別菌株能產生菌素。 即便在安全分級目錄中列為一級免做理學試驗的， 開展生物有機肥產品生產生物安全風險評價， 從源頭上把好安全關是產品質量安全的首要保障。通過調研發(fā)現， 用于生物有機肥產品的部分生產分類地位不明確， 甚至混亂， 難以從源頭上進行安全風險的初步識別 。 以常見生產枯草芽孢菌為例， 實際上是一個表型相似的群體， 包括枯草芽孢菌、 地衣芽孢菌、 短小芽孢菌、解淀粉芽孢菌、 深褐 （萎縮） 芽孢菌、莫哈韋（莫杰夫） 芽孢菌、 死谷芽孢菌、 索諾拉沙漠芽孢菌、 特基拉芽孢菌、暹羅芽孢菌等 10個緣種。生產企業(yè)送檢的枯草芽孢菌生物有機肥產品， 經鑒定發(fā)現很多產品實際為解淀粉芽孢菌， 且許多菌株具有很強的溶血作用。通過對生產企業(yè)調研發(fā)現， 部分生產企業(yè)選擇分離于動物腸道的解淀粉芽孢菌作為產品生產用菌株， 該類生產發(fā)酵周期短、 活菌數量高、 生產成本低， 但產品的應用功效不佳， 溶血風險大 ， 建議慎用。而植物來源的解淀粉芽孢菌溶血風險小， 產品應用效果好， 推薦使用。

低溫生物菌種——常用菌種介紹

球形芽孢菌

球形芽孢菌是一種在自然界中廣泛分布、形成亞末端膨大孢子囊和球形芽孢的好氣芽孢菌。在已發(fā)現的49個鞭毛型中有9個(H1、H2、H3、H5、H6、H9、H25、H26和H48)的菌株對蚊幼蟲有一定的殺毒作用。其中大部分高毒力菌株屬型H5、H6和H25，如2362、1593、2297、Ts-1和C3-41等[6～11]。根據其殺蚊活性，這些菌株分為高毒力菌株和低毒力菌株，所有有毒菌株都具有較高的DNA同源性（>79%），屬DNA同源型IIA型。

球形芽孢菌對不同蚊幼蟲的殺毒作用主要是由其產生的毒蛋白實現的。現已證明在其生長發(fā)育過程中能產生兩類不同毒蛋白，一類是存在于所有高毒力菌株中的晶體毒蛋白；另一類是存在于低毒力菌株中部分高毒力菌株中的Mtx素蛋白。