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發(fā)布時(shí)間:2021-10-23 07:43  






武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);可以開(kāi)展各類動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。蔗果寡糖是雙歧因子,能促進(jìn)雙歧增殖,而雙歧是典型的有益菌,它可吸收,合成多種維生素,促進(jìn)腸蠕動(dòng),分泌乳酸,抑制某些有害菌生成,防止,增體等諸多功能。




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構(gòu)建了植物表達(dá)載體pBRSAg,該載體具有完整的植物表達(dá)元件,CaMV35S啟動(dòng)子、農(nóng)T-DNA左右邊界、植物報(bào)告基因gus和植物選擇標(biāo)記基因hpt,適用于農(nóng)的轉(zhuǎn)化;通過(guò)凍融法將重組質(zhì)粒pBRSAg轉(zhuǎn)入根癌農(nóng)LBA4404中,利用農(nóng)介導(dǎo)法轉(zhuǎn)化葉盤(pán),經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得植株。GFP,實(shí)際是給你要研究的物質(zhì)加上標(biāo)記,在此相當(dāng)于報(bào)告蛋白的作用??剐灾仓杲?jīng)GUS染色和PCR檢測(cè)為陽(yáng)性,初步表明表面抗原基因在中得到表達(dá)。


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F-box蛋白通過(guò)在UPP(泛素-蛋白酶體途徑)中特異識(shí)別底物蛋白而參與細(xì)胞周期調(diào)控、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、細(xì)胞凋亡、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等生命活動(dòng)。β-1,3-葡聚糖酶屬于典型的PR2蛋白,可水解許多種真菌細(xì)胞壁的主要成分β-1,3-葡聚糖,在植物抵御真菌病原的防衛(wèi)反應(yīng)中發(fā)揮重要作用。很多研究結(jié)果表明F-box蛋白通過(guò)SCF復(fù)合體調(diào)節(jié)多種的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑,如IAA、JA、GA和乙烯的信號(hào)傳導(dǎo),并且與植物對(duì)非生物脅迫的響應(yīng)有很大的關(guān)系。故其對(duì)植物抗逆性研究有重要意義。鷹嘴豆是世界第三大豆類作物,主要生長(zhǎng)在干旱和半干旱地區(qū)。它具有生育期短,基因組小的特點(diǎn)。經(jīng)過(guò)長(zhǎng)時(shí)間的進(jìn)化和對(duì)不良環(huán)境的適應(yīng),鷹嘴豆具有了豐富的耐旱、耐低溫和耐鹽堿等抗逆基因,因此具有其自身的優(yōu)勢(shì)來(lái)研究植物的抗逆機(jī)制。目前,鷹嘴豆在分子生物學(xué)方面的研究較為少。 本研究從EST庫(kù)中挑選到兩個(gè)F-box蛋白基因在干旱脅迫下表達(dá),采用RACE技術(shù)其全長(zhǎng),并對(duì)目的基因進(jìn)行了初步的生物信息學(xué)分析和轉(zhuǎn)錄水平的表達(dá)譜分析,旨在為進(jìn)一步揭示鷹嘴豆F-box蛋白在植物的生長(zhǎng)發(fā)育及在逆境信號(hào)傳導(dǎo)中的作用奠定理論基礎(chǔ)。 CarF-box1基因的開(kāi)放閱讀框(ORF)長(zhǎng)1093bp,編碼一條345個(gè)氨基酸殘基的多肽,含有F-box結(jié)構(gòu)域和Kelch結(jié)構(gòu)域。其理論等電點(diǎn)為5.38,分子量為38.37kDa。CarF-box1基因不含有內(nèi)含子。熒光定量PCR分析表明,CarF-box1在鷹嘴豆的根、莖、葉、花、成熟豆和成熟莢中均有表達(dá),在花中表達(dá)極高。


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