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發(fā)布時間:2021-07-08 06:25  






等溫核酸試劑盒

核酸試劑盒的原理

核酸檢測,其實就是通過檢測熒光信號的累積來確定樣本中是否有病毒核酸?,F(xiàn)在核酸檢測試劑盒(多重熒光RT-PCR法),能夠實現(xiàn)一小時快速診斷。

根據銳科技發(fā)布的文章《如何進行核酸檢測帶你揭秘全過程》,目前的病毒核酸檢測試劑盒,多數采用熒光定量PCR方法。檢測原理是以病毒的基因序列為檢測靶標,通過PCR擴增,使我們的選擇這段靶標DNA序列指數級增加,每一個擴增出來的DNA序列,都可與我們預先加入的一段熒光標記探針結合,產生熒光信號,擴增出來的靶基因越多,累計的熒光信號就越強。



如何提高擴增曲線的可重復性?

優(yōu)化擴增曲線考慮以下因素: 對于低拷貝數模板,不穩(wěn)定擴增可能是因為達到檢測限或者是反應混勻程度不同(未混勻的反應擴增效率不佳)。另外,在低溫情況下存貯,重組酶和輔助蛋白在50%甘油情況下形成沉淀,也是可能導致不穩(wěn)定擴增的原因。所以,20x核心反應mix在室溫下解凍并震蕩渦旋將使其成為液體,不影響其功能,并且有效提高擴增效率。不穩(wěn)定擴增也可能是因為master mix量不足,在加入體系前,用戶必須保證震蕩后20x核心反應組分均一。



近年來,等溫擴增方法的發(fā)展讓基因檢測得以擺脫熱循環(huán)儀器的使用,因此更加便捷化?;诘葴財U增方法,多種具有POCT潛力的SARS-CoV-2檢測技術得以開發(fā)出來。特別是結合CRISPR技術后,檢測的特異性和靈敏度得到了進一步提升。盡管如此,幾乎所有這些報道的技術僅僅證明了其在單基因檢測中的應用。然而,臨床認可的金標準方法,如RT-qPCR,通常需要檢測兩個基因。因為雙基因檢測能夠有效地避免因基因部分降解,基因拷貝數差異和擴增錯誤等引起的潛在假陰性結果。



距離新冠疫情發(fā)生已經近4個月了,不少科研工作者都積極投身到了新冠的相關研究當中……

試紙條是一款基于側向層析技術和膠體金標記技術的即用型快速檢測試紙條。該款試紙條可用于蛋白、基因擴增產物(PCR,LAMP,RPA)的定性/半定量檢測。研究者需要自行設計分別標記有生物素的特異性檢測物(如抗原、探針)和標記有FITC的特異性檢測物(如探針)。




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