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1.將處理好的樣本、研磨球依次加入離心管中;
2.將裝好樣品的離心管放入適配器中;
3.將帶有樣品的適配器放入液氮中冷凍數(shù)分鐘;
4.將冷凍后的樣品和適配器放在夾具中間,調(diào)整好位置;
5.將夾具放在樣品臺上,定位槽定位,旋緊垂直定位旋鈕,安全鎖歸位;
6.蓋上儀器的安全門;
7.設(shè)置振動頻率、振動時(shí)間;
8.啟動儀器,執(zhí)行破碎過程;
9.等待儀器完全停止振動后關(guān)機(jī),打開安全門,取出樣品;
10.儀器的歸位。
組織研磨儀研磨魚肉組織實(shí)驗(yàn)具體操作
以下內(nèi)容是由北京駿騰斯瑞有限公司提供,希望對同行業(yè)有所幫助!
①取兩塊背部魚肉,每塊五克左右;
②用剪刀將其剪碎,分別裝入兩個研磨罐,同時(shí)每罐再放入2顆直徑15mm研磨珠,然后旋緊研磨罐,將罐固定在中通量組織研磨儀中;
③將研磨頻率設(shè)定在1800次/分鐘,研磨時(shí)間設(shè)為3-5分鐘,然后啟動儀器;
④時(shí)間到,儀器自動停止,取出樣品即可。
以下內(nèi)容是由北京旭鑫盛科有限公司提供,希望對同行業(yè)有所幫助!
每50~100mg 組織加入0.2體積 TRIzol
1.加鋼球1顆,設(shè)置研磨儀參數(shù):12單位振頻,1min,每種樣品基本充分勻漿
2. 將上述勻漿液每0.2體積 TRIzol 試劑用量的勻漿液中加入0.04體積氯方,蓋緊管蓋,手動劇烈震搖15 秒鐘,然后室溫靜置2~3 分鐘。
3. 4℃ 10,000g 離心10 分鐘。
4. 小心吸取上層水相(無色)加入到新試管中,同時(shí)計(jì)算所吸取的水相體積。不必過多吸取,防止吸入DNA和蛋白雜質(zhì)(中間層,白色)。
5. 加入所吸取水相等體積預(yù)冷的異丙淳,蓋緊管蓋,輕輕搖勻。
6. 室溫靜置10 分鐘,待RNA 充分沉淀(為減少RNA 降解,此步驟可省略)。
7. 4℃ 10,000g 離心10 分鐘。
8. 將上清棄除(注意別丟棄沉淀),每管加入0.2體積75%乙醇潤洗,蓋緊管蓋,輕輕晃動試管,以去除殘留的異丙淳和鹽份。4℃ 7,500g 離心5 分鐘。
9. 將上清棄除(注意別丟棄沉淀),打開管蓋,將RNA 沉淀干燥(室溫?fù)]發(fā)或真空干燥)。注意RNA 沉淀不可完全干燥,否則難以溶解。
10. 將RNA 沉淀溶解于適量的無RNase 水中。如果RNA 沉淀溶解不完全,將使OD260/OD280≤1.6。此RNA 溶液可用于進(jìn)一步實(shí)驗(yàn),或者-70℃保存。