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HPLC定性分析的主要方法與技術(shù)。

使用保留值定性方法

在所有定性分析方法中， HPLC使用保留值定性分析的方法是基本的方法，他就是合理地運(yùn)用色譜的一些基本知識(shí)對(duì)有機(jī)化合物所作的反應(yīng)，從而得出有機(jī)化合物應(yīng)具有的性質(zhì)。HPLC中，兩種相同的物質(zhì)在同一色譜中應(yīng)具有相同的保留值，因此， HPLC中的定性分析就能充分地應(yīng)用到這一原理，用相同的色譜對(duì)未知物質(zhì)進(jìn)行簡(jiǎn)單的成分和性質(zhì)判斷，同時(shí)在同一物質(zhì)組分下色譜上形成的未知峰保留值也是一樣的，這樣就可以初步判定未知有機(jī)化合物。HPLC的流動(dòng)相在此基礎(chǔ)上，適當(dāng)改變流動(dòng)相來(lái)判斷未知有機(jī)化合物的基本性質(zhì)，而在連續(xù)變化的過(guò)程中，當(dāng)發(fā)現(xiàn)兩個(gè)保留值峰值相同時(shí)，我們可以簡(jiǎn)單地判斷為未知有機(jī)化合物的性質(zhì)相同。盡管 HPLC的保留值定性分析方法可以區(qū)分同樣的物理性質(zhì)，但不能保證具有相同保留值的兩個(gè)有機(jī)化合物是同一種物質(zhì)，因此在實(shí)際應(yīng)用中， HPLC利用保留值定性分析的方法雖然簡(jiǎn)單，而且很具操作性，但適用范圍較窄，不能適應(yīng)更多未知有機(jī)化合物的性質(zhì)判定。

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液相色譜儀輸液系統(tǒng)：

輸注系統(tǒng)即高壓恒流泵，其作用是提供穩(wěn)定、準(zhǔn)確的流量。

1、溶劑過(guò)濾頭。液體過(guò)濾頭或沉淀器主要用于過(guò)濾在流動(dòng)相中可能存在的顆粒狀雜質(zhì)。長(zhǎng)期使用后，雜質(zhì)會(huì)堵塞溶劑過(guò)濾頭的濾板孔隙，或長(zhǎng)期使用緩沖液，過(guò)濾頭表面很容易形成一層膜，妨礙正常的流動(dòng)相通過(guò)。嚴(yán)重者，即使是已經(jīng)超聲處理的溶劑，泵吸液時(shí)仍會(huì)有氣泡在四氟化輸液管中產(chǎn)生，因此要經(jīng)常清洗。清潔劑可選用乙醇或30%稀硝i酸溶液，正相系統(tǒng)需注意濾頭干燥。

2、單向閥。本單向閥的作用是確保液體朝一個(gè)方向流動(dòng)，保證高壓恒流泵的穩(wěn)定注入。在日常使用中，可通過(guò)觀察壓力情況初步判斷流量是否正常。若系統(tǒng)經(jīng)過(guò)一定時(shí)間平衡，壓力應(yīng)穩(wěn)定。但是如果有壓力波動(dòng)，就表示流量是不穩(wěn)定的，如果沒(méi)有壓力，表示沒(méi)有流動(dòng)。大多數(shù)情況下都是由于氣門中混入了氣泡或雜質(zhì)。如果出現(xiàn)氣泡，應(yīng)將放空閥打開(kāi)，按沖洗鍵將氣泡從內(nèi)部排出。如單向閥與雜質(zhì)混在一起，必須清洗。清潔溶劑可選用乙醇，安裝時(shí)要注意標(biāo)記環(huán)向。

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氣體色譜法缺陷

當(dāng)對(duì)成分進(jìn)行直接定性分析時(shí)，必須以已知或已知數(shù)據(jù)與相應(yīng)色譜峰相比較，或與其它方法(如質(zhì)譜、光譜)結(jié)合使用，才能得到直接確定的結(jié)果。定量時(shí)，常常需要用已知物純樣品對(duì)被測(cè)信號(hào)進(jìn)行校正。

原則：

GC分析是一種多組份混合物的分離、分析技術(shù)。用氣體作為流動(dòng)相(載氣)，當(dāng)樣晶被送入進(jìn)樣器并氣化后，由載氣攜帶到填充柱或毛細(xì)柱，由于樣晶中各組份的沸點(diǎn)、極性和吸附系數(shù)的差異，使各組份在柱中被分離，然后被撞擊到柱后的檢測(cè)器根據(jù)各組份的物理化學(xué)特性，將轉(zhuǎn)換后的電信號(hào) I固序檢測(cè)出來(lái)，將轉(zhuǎn)換后的電信號(hào)送到色譜工作站，由色譜工作站對(duì)各組份進(jìn)行分析，得到各組份的分析結(jié)果。

特征：

1.全自動(dòng)在結(jié)式非甲皖總怪分析系統(tǒng)，具有控制、數(shù)據(jù)采集、積分計(jì)算、數(shù)據(jù)上傳等功能

2.可實(shí)現(xiàn)意外斷電、回電后，微電腦、儀器控溫、儀器分析、數(shù)據(jù)上傳等功能將自啟動(dòng)

3.能在 FID意外滅火后自動(dòng)切斷氫氣并報(bào)警

4.能同時(shí)分析全怪、甲皖、苯系物等多種氣體

5.色譜組分的標(biāo)定、分析、實(shí)時(shí)顯示、維護(hù)等功能，通過(guò)簡(jiǎn)潔的界面操作完成

6.軟件界面簡(jiǎn)潔易用

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電泳原理：

本發(fā)明主要由電源和電泳槽兩部分組成。電力供應(yīng)直流，并在電泳槽中產(chǎn)生電場(chǎng)，推動(dòng)帶電分子的遷移。電泳槽可分為水平式和豎直式。立板式電泳是一種比較常用的電泳法，常用于聚丙i烯酰胺凝膠電泳。電泳槽中間有兩片夾在一起的玻璃板，玻璃板兩邊用塑料條隔開(kāi)，然后將電泳凝膠放在玻璃板中間，凝膠一般大小12 cm,14 cm厚1~2 mm厚，近幾年新開(kāi)發(fā)的電泳槽，膠面更小、更薄，從而節(jié)省試劑和縮短電泳時(shí)間。在制膠時(shí)，將一根塑料梳子放入膠體溶液中，將膠聚物移去，形成上樣凹槽。橫向電泳，在水平玻璃或塑料薄板上貼一層薄薄的濕濾紙，將凝膠和電泳緩沖液連接起來(lái)，或直接將凝膠浸入緩沖液中。當(dāng) pH值發(fā)生變化時(shí)，會(huì)使帶電分子電荷發(fā)生變化，從而影響電泳遷移的速度，因此，應(yīng)該在合適的緩沖液中進(jìn)行電泳，使所述緩沖液能保持被分離物帶電性能的穩(wěn)定。