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首先,什么是緩沖溶液?緩沖液(Buffer solution)通常是由「弱酸及其共軛堿」或「弱堿及其共軛酸」緩沖對所組成的溶液,能夠在加入一定量其他物質(zhì)時減緩pH的改變。以生物實驗中的一種緩沖液PBS為例,是由Na2HPO4、KH2PO4組成的緩沖對,在PH5.8-8.0范圍內(nèi)有較強的緩沖能力。
01、緩沖原理
假設(shè)緩沖溶液里含有弱酸HA以及它的共軛堿 。
水合氫離子的濃度取決于弱酸與其共軛堿的濃度比。當加入少量強堿時,酸被中和,導(dǎo)致了氫氧根離子在溶液中很少累積,從而的濃度增加,的濃度減少??梢钥吹剑m然加入了強堿,但是溶液里的氫氧根離子變化很少,同時,濃度較大,相對的變化小,兩者比值幾乎無變化,因此根據(jù)公式,水合氫離子的濃度變化很小。加入弱酸則是同樣的道理。由于在大濃度基數(shù)上的微小變化不會改變比值,也因此維持了體系內(nèi)氫離子和氫氧根離子濃度的平衡。
三羥(Tris)是一種應(yīng)用非常廣泛的有機試劑,它的有效緩沖范圍在pH7.0到9.2之間。它及其衍生物被廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)和分子生物學(xué)實驗中的緩沖液的制備,可用于制作、有機合成、生物緩沖劑等。其中在生化實驗中,許多蛋白質(zhì)及核酸相關(guān)的實驗都需要用Tris作為生物緩沖劑。它甚至有超過磷酸鹽緩沖液的趨勢,本文將對其衍生緩沖液進行簡述。