廣州碩譜生物科技有限公司氨丙基SPE柱分類

保留雜質(zhì)這種凈化模式多用于食品或農(nóng)殘的檢測，下面舉個例子：

食品中丙1烯酰胺的檢測，樣品經(jīng)提后，凈化；

SPE柱：月旭Welchrom? C18E 500 mg/6mL；

活化：5mL甲1醇，5mL水；

上樣：待凈化液，收集；

洗脫：2mL30%甲1醇分次潤洗燒瓶，再上樣，收集，抽干；

合并上樣液和洗脫液，并用30%甲1醇水定容至5mL，并過0.22 μm濾膜，上HPLC檢測。

當我們使用硅膠鍵合填料型色譜柱時，基于色譜知識，了解到硅膠鍵合填料一般廠商推薦的 pH值范圍是2-8，那么對于使用硅膠鍵合填料的固相萃取小柱，是否有必要嚴格遵守這一規(guī)定？

我們需要了解廠家推薦的pH2-8耐受范圍，是為了保證色譜柱的正常使用壽命，硅膠鍵合相在耐受范圍之外使用時，會導(dǎo)致鍵合相與硅膠基質(zhì)發(fā)生斷裂，從而破壞色譜柱的效力和保持其特性，但我們知道， pH耐受范圍以外的溶劑對色譜柱的影響，主要是一個累積的過程，在這種溶劑的作用下，色譜柱的性能會發(fā)生變化，從而使色譜柱的性能發(fā)生變化，產(chǎn)生不可逆轉(zhuǎn)的變化，壽命縮短。SPE小柱和色譜柱之間的一個區(qū)別是， SPE是一次性消耗品，在耐受溶劑范圍之外，短時間的溶劑洗滌對小柱的保留特性幾乎沒有影響，而且不會造成保留的顯著差異，因此它使用的 pH值范圍較寬，一般可在 pH值范圍1-10之間使用，而不會造成結(jié)果的差異。舉一個簡單的例子，同樣是分析蔬菜中的多菌靈(一類堿性農(nóng)1藥)，使用陽離子交換柱可以專一性地保留這些農(nóng)1藥，使它們基本與干擾物完全分離，而使用正相吸附劑或石墨化炭黑進行保留干擾物的操作僅能把主要的干擾物除去，仍有較多干擾物存留。

樣品前處理在儀器分析過程中是一個既耗時又極易引進誤差的步驟，樣品處理的好壞直接影響色譜分析的結(jié)果，固相萃取小柱又是一種用途廣泛而且越來越受歡迎的樣品前處理技術(shù)，因此，為了提高分析測定效率，使用好固相萃取小柱是非常有必要

正相機制：

在許多固相萃取材料的極性表面和樣品中目標化合物的極性官能團之間會產(chǎn)生極性力。通常使用極性力的吸附劑在色譜中被稱為正相色譜吸附劑。極性力強度大于非極性力，但小于離子力強度；常用的極性基團有羥基、胺基、巰基等。

由于非極性溶劑不能與極性固定相材料形成具有氫鍵的官能團，因此非極性基質(zhì)環(huán)境對吸附劑和目標化合物之間的極性作用力是有利的。結(jié)果表明，在極性作用下，樣品的固相萃取過程中，基質(zhì)主要是非極性的，如正己烷、二氯甲1烷、菜油等，而目標化合物多含有極性較大的官能團。27—2011食品安全國家標準食品中苯并（a）芘的測定中，采用去活的氧化鋁層析柱進行油脂中苯并（a）芘測定的前處理，使用溶劑多，耗時長，方法較繁瑣。

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排氣泡注意事項

排泡時，一般排除1/3柱體體積的溶劑即可排除填充物中的氣泡，切記不可將溶液排干。防脫水，手動排氣泡速度不易過快，但也不能過慢，過慢的速度可能無法排出較大的氣泡。

要是激i活平衡液不小心排干了怎么辦？只需再加入活化溶劑，使之成為氣泡。

適當?shù)嘏懦龤馀菘梢栽谝欢ǔ潭壬媳苊膺^慢或流速不穩(wěn)定的情況。那么我們的恢復(fù)，平衡性能不能得到保證？有一種神奇的小操作，就是在做完這兩個步驟后抽干，這樣我們就可以得到更好的實驗結(jié)果。

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固相萃取的基本原理：

非極性力

非極性作用力產(chǎn)生于固相萃取材料官能團上的碳氫鍵與目標物的碳氫鍵之間。這種作用力是范德華力貨散射力。一般在固相萃取中幾種常見的作用力，非極性作用力zui小，經(jīng)常用于從樣品基質(zhì)中吸附分離具有非極性結(jié)構(gòu)的目標物。常見的非極性鍵合相有c18 、c8、苯i基。通過非極性作用力吸附在非極性Spe柱上的目標物，可以具有非極性性質(zhì)的溶劑洗脫，如氯i仿、二氯甲i烷、乙i酸乙酯，只要溶劑的洗脫強度足以破壞目標物與spe填料之間的范德華力，就可以把目標物從spe柱上洗脫下來，即便是極性較強的甲i醇，對于許多化合物來說也具有足夠的非極性作用力將其洗脫。第四，能不能重復(fù)用還要看di一個樣品是否很臟，不然過柱費力啊。如如果洗脫溶劑不能把疏水強的目標物洗脫下來，可以考慮二氯甲i烷：乙i酸乙酯=1:1。