熒光光譜

熒光分析法是指利用某些物質(zhì)被紫外光照射后處于激發(fā)態(tài)，激發(fā)態(tài)分子經(jīng)歷一個(gè)碰撞及發(fā)射的去激發(fā)過程所發(fā)生的能反映出該物質(zhì)特性的熒光，可以進(jìn)行定性或定量分析的方法。由于有些物質(zhì)本身不發(fā)射熒光（或熒光很弱），這就需要把不發(fā)射熒光的物質(zhì)轉(zhuǎn)化成能發(fā)射熒光的物質(zhì)。例如用某些試劑（如熒光染料），使其與不發(fā)射熒光的物質(zhì)生成絡(luò)合物，各種絡(luò)合物能發(fā)射熒光，再進(jìn)行測定。因此熒光試劑的使用，對(duì)一些原來不發(fā)熒光的無機(jī)物質(zhì)和有機(jī)物質(zhì)進(jìn)行熒光分析打開了大門，擴(kuò)展了分析的范圍。

熒光光譜特點(diǎn)

靈敏度更高  g/ml，應(yīng)用不如UV廣泛。應(yīng)用：①直接熒光光度法②作為HPLC的檢測器（用的多）根據(jù)物質(zhì)分子吸收光譜和熒光光譜能級(jí)躍遷機(jī)理，具有吸收光子能力的物質(zhì)在特定波長光（如紫外光）照射下可在瞬間發(fā)射出比激發(fā)光波長長的光，即熒光。 分子受特定光照射后處于激發(fā)態(tài)的 分子返回基態(tài)時(shí)發(fā)出熒光, 其熒光強(qiáng)度與 呈線性關(guān)系, 從而可測出氣體濃度。當(dāng)檢測儀器系統(tǒng)確定后，熒光總光強(qiáng)I與 濃度的之間的關(guān)系可表示為：I=KC在穩(wěn)定的條件下，這些參數(shù)也隨之確定，k可視為常數(shù)。因此，式中I=kC表示的紫外熒光光強(qiáng)I與樣氣的濃度C成線性關(guān)系。這是紫外熒光法進(jìn)行定量檢測的重要依據(jù)。

熒光光譜體系間跨越

是處于激發(fā)態(tài)分子的電子發(fā)生自旋反轉(zhuǎn)而使分子的多重性發(fā)生變化的過程。分子由激發(fā)單重態(tài)跨越到激發(fā)三重態(tài)后，熒光強(qiáng)度減弱甚至熄滅。含有重原子如碘、等的分子時(shí)，體系間跨越為常見，原因是在髙原子序數(shù)的原子中，電子的自旋與軌道運(yùn)動(dòng)之間的相互作用較大，有利于電子自旋反轉(zhuǎn)的發(fā)生。另外，在溶液中存在氧分子等順磁性物質(zhì)也容易發(fā)生體系間跨越，從而使熒光減弱。

熒光分析的第二個(gè)特點(diǎn)是選擇性強(qiáng)，特別是對(duì)有機(jī)化合物而言。因熒光光譜既包括激發(fā)光譜又包括發(fā)射光譜，凡是能發(fā)射熒光的物質(zhì)，必須首先吸收一定波長的紫外線，而吸收了紫外線后不一定就發(fā)射熒光。能發(fā)射熒光的物質(zhì)，其熒光波長也不盡相同。如果即使熒光光譜相同的話，而它的激光光譜也不一定相同。反之如果它們的激發(fā)光譜相同，則可用發(fā)射光譜把它們區(qū)分開來，因此供選擇的余地是比較多的。所以熒光分析的選擇性很強(qiáng)。例如有兩種物質(zhì)，它們的熒光光譜很相似，不易把它們分開。但它們的激光光譜不會(huì)相同，因此就可用掃描激光光譜把它們分開。如果用分光光譜法就難以辦到這一點(diǎn)，因?yàn)榉止夤庾V只能得到待測物質(zhì)的特征吸收光譜。所以分光光譜法的選擇性就沒有熒光分析法強(qiáng)。