(1) 根據(jù)試驗(yàn)要求,制備枯草黑色變種芽孢懸液和芽孢樣片。

(2) 每次試驗(yàn)取 2 個(gè)菌片為一組,平放于無(wú)菌平皿內(nèi),勿重疊。加蓋,分置于滅菌柜的各層,內(nèi)、中、外不同部位。試驗(yàn)時(shí),滅菌柜內(nèi)片樣本外,還應(yīng)滿載以模擬的常規(guī)處理物品。

(3) 關(guān)閉柜門,開(kāi)啟電源,按滅菌柜設(shè)計(jì)程序進(jìn)行滅菌。滅菌完畢,取出平皿,將菌片取出接種于含 5.0ML 營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基試管中,置 37℃ 培養(yǎng)箱內(nèi)作定性培養(yǎng)。72 H 后觀察結(jié)果。

肉湯管混濁者表示有菌生長(zhǎng), 判為陽(yáng)性; 肉湯管澄清者表示無(wú)菌生長(zhǎng), 繼續(xù)培養(yǎng)至第 7 D, 若仍無(wú)菌生長(zhǎng),判為陰性。

對(duì)難以判定的肉湯管,取其中 0.2ML 懸液接種營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板,用滅菌 L 棒涂佈均勻,置 37℃ 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。48 H 后涂片染色，在顯微鏡下觀察菌落形態(tài),或進(jìn)一步做其他試驗(yàn),以判斷生長(zhǎng)者是否為試驗(yàn)菌。若有非試驗(yàn)菌污染，應(yīng)查找原因重新進(jìn)行試驗(yàn)。

(4) 測(cè)試中,應(yīng)同時(shí)設(shè)立定性和定量陽(yáng)性對(duì)照組(菌片對(duì)照)與陰性對(duì)照組(培養(yǎng)基對(duì)照)。

(5) 定量陽(yáng)性對(duì)照組,以同批試驗(yàn)用菌片放在室溫下,待試驗(yàn)組滅菌接種后,立即將該菌片 2 片分別移入含 5.0ML PBS試管中,各振蕩 80次洗滌。進(jìn)行活菌培養(yǎng)計(jì)數(shù)。

(6) 定性陽(yáng)性對(duì)照組，以同批試驗(yàn)用菌片放在室溫下,待試驗(yàn)組滅菌接種后,立即將試驗(yàn)菌片 2 片，分別接種于 5.0ML 營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱中作定性培養(yǎng),觀察有細(xì)菌生長(zhǎng)情況。

(7) 陰性對(duì)照組,以空白樣片 2 片，分別接種于 5.0ML 營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基,同時(shí)將未接種過(guò)的營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基放入培養(yǎng)箱中作定性培養(yǎng),觀察有無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)。

(8) 試驗(yàn)重復(fù) 5 次。

(9) 在 5 次試驗(yàn)中,每次試驗(yàn)中陽(yáng)性對(duì)照菌片的回收菌量均應(yīng)達(dá)5×`10^5` CFU/片～5×`10^6`CFU/片；定性陽(yáng)性對(duì)照組，細(xì)菌生長(zhǎng)良好；陰性對(duì)照應(yīng)無(wú)菌生長(zhǎng)。陽(yáng)性或陰性對(duì)照若有不符合上述要求的結(jié)果,試驗(yàn)作廢,重新進(jìn)行。

真空干燥箱和一般的烘箱區(qū)別在于：

　　真空箱：是在負(fù)壓下工作，氧含量少，可以減少或杜絕氧化反應(yīng)。

　　負(fù)壓下溶劑的沸點(diǎn)降低，避免高溫干燥損壞物料品質(zhì)。

　　若溶劑為有害或有價(jià)值的氣體可以冷凝回收。

　　缺點(diǎn)是：溫度均與性不好控制，如需控制均與性必須做多層層板且獨(dú)立加熱。也有真空箱體帶風(fēng)機(jī)，先真空再充氮?dú)獾募訜岬?。這樣可以減少氧化，且通過(guò)鼓風(fēng)保證均勻性。但是沒(méi)有辦法降低溶劑沸點(diǎn)。

　　一般烘箱：是通過(guò)電加熱再加鼓風(fēng)，用熱空氣換熱使物料干燥。通常較真空干燥比造價(jià)低，運(yùn)行成本低。

工業(yè)烘箱

　1、烘箱大小的選型：工作室大小可根據(jù)試驗(yàn)物品的大小和多少來(lái)確定。恒溫干燥過(guò)程中，工作室試驗(yàn)物品的數(shù)量和擺放方式影響工作室內(nèi)溫度的均勻性。對(duì)溫度均勻性要求比較高時(shí)，建議減少試樣數(shù)量或選大型號(hào)的烘箱，保證工作室內(nèi)熱風(fēng)對(duì)流。特點(diǎn)：不僅適用于一般的干燥，但也適用于真空灌封，水分測(cè)試，，調(diào)理和脫水。物品試樣離內(nèi)壁或進(jìn)出風(fēng)口保持2~3cm或更大間隙，有利于工作室內(nèi)部熱風(fēng)對(duì)流。

　　2、溫度范圍的選擇與使用溫度的關(guān)系：熱風(fēng)循環(huán)烘箱溫度范圍有三種：RT 10~300℃、RT 10~500℃、10~600℃(高溫烘箱)。使用溫度在290℃以下時(shí)，建議選擇RT 10~300℃溫度范圍的烘箱;使用溫度在300℃~450℃之間時(shí)，請(qǐng)選用500℃溫度的高溫烘箱(干燥箱);使用溫度在450℃~560℃之間時(shí)，請(qǐng)選用600℃溫度的高溫烘箱(干燥箱)。真空干燥箱干燥的優(yōu)勢(shì)與傳統(tǒng)干燥技術(shù)具有以下流通真空環(huán)境，大大減少了需要去除液體的沸點(diǎn)，因此可以很容易地應(yīng)用到真空干燥熱敏感材料。

烘烤完結(jié)后先截?cái)嚯娫矗蠓娇纱蚪犸L(fēng)循環(huán)烘箱室門，牢牢記住不可以直接用手接觸烘烤的東西，要用專用的工具或帶隔熱手套兒取烘烤的東西，免得。還是等室內(nèi)溫度冷卻，再取生產(chǎn)品。

　　熱風(fēng)循環(huán)烘箱維護(hù)方便，簡(jiǎn)單易用;熱風(fēng)循環(huán)烘箱不需要繁鎖的操作即可使用，并且使用簡(jiǎn)單，維護(hù)上也很方便，如有零部件壞損，更換簡(jiǎn)單，一名普通電工即可完成維修，并且在日后如有功能缺少需要補(bǔ)充，改造也比較簡(jiǎn)單;