終止液(3M H2SO4):蒸餾水178.3ml,逐滴加入(98%)21.7ml。(5) 底物緩沖液(PH5.0磷酸棗檸檬酸):0.2MNa2HPO4(28.4克/L)25.7ml0.1M檸檬酸(19.2克/L) 24.3ml加蒸餾水50ml。(6) TMB(四)使用液:TMB(10mg/5ml無水乙醇)0.5ml底物緩沖液(PH5.5) 10ml0.75%H2O2 32μl(7) ABTS使用液:ABTS 0.5mg底物緩沖液(PH5.5) 1ml3%H2O2 2μl(8) 抗原、和酶標(biāo)記。(9) 正常人和陽性對照。

檢測及酶結(jié)合物的稀釋度合適(均為1:30), 方便試驗操作者準(zhǔn)確地做稀釋工作,保證實驗結(jié)果的重復(fù)性。白介素6是一種,已被證實為B細(xì)胞分化因子.它是一種形成系統(tǒng),它的生理特性,如肝細(xì)胞急性蛋白合成的誘導(dǎo)和基于和白介素3協(xié)同作用的生激等,也備受關(guān)注.并且已證實白介素-6與病理學(xué)存在穩(wěn)定的相關(guān)關(guān)系.例如,報道多種疾病的生長因子為白介素-6, 瘤細(xì)胞能合成白介素-6并表達(dá)白介素-6受體。
使用貼壁細(xì)胞時:① 棄盡培養(yǎng)液,向培養(yǎng)皿中加入650 μl的Solution A,室溫靜置1分鐘。注)96孔板等的每個孔中一次容納不了650 μl 溶液時,請分?jǐn)?shù)次處理細(xì)胞。② 用移液槍的槍頭吹落貼壁培養(yǎng)細(xì)胞,取650 μl的細(xì)胞懸浮液轉(zhuǎn)移至Collection Tube中。③ 加入0.8 μl的RNase A1,激烈振蕩15秒鐘,然后室溫靜置1分鐘。2. 加入400 μl的Solution B,振蕩混合。3. 加入1 ml的4℃預(yù)冷的Solution C,充分混勻后,12,000 rpm離心2分鐘。4. 棄去上層有機相,再加入1 ml的4℃預(yù)冷的Solution C,充分混勻后,12,000 rpm離心2分鐘。