低溫生物菌種的篩選分離

篩選：工業(yè)發(fā)酵的有用菌種，其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復篩，挑選具有某種能力的有用菌種。

分離：首先是從土壤或腐生植物中收集含菌樣品，用無菌水稀釋后，涂布于置有適宜細菌、霉菌生長的瓊脂培養(yǎng)基平皿上，并將其倒置于恒溫箱中，培養(yǎng)一定時間，平皿上長出的許多單個菌落（單一微生物的集落）經(jīng)分別分離后即為各種純種菌株，簡稱純種，移種至試管斜面培養(yǎng)基上，置4℃冰箱備用。

篩選模型：根據(jù)不同的篩選目的，采用不同的篩選模型。如常規(guī)篩選菌種的方法是將土壤中分離所得的純種，在含有瓊脂培養(yǎng)基的平皿上培養(yǎng)后，用打孔器將菌塊移至含有試驗菌的瓊脂培養(yǎng)基上，在適宜的溫度下培養(yǎng)一定時間后取出，如在菌塊的周圍有透明的抑菌圈，則表明此菌種具有產(chǎn)生抑制試驗菌生長的菌種物質(zhì)的能力。所得菌種經(jīng)過搖瓶液體發(fā)酵，測定發(fā)酵液或菌絲體內(nèi)菌種的含量，選出生產(chǎn)能力高的菌種。另一方面對所提取的菌種進行結構分析、藥理試驗及臨床試驗等，確為有效者，即可作為生產(chǎn)菌種。又如篩選脂肪酶生產(chǎn)菌種的方法是將分離所得的霉菌涂布于含有牛脂的瓊脂培養(yǎng)基上，恒溫培養(yǎng)一定時間，如菌落周圍出現(xiàn)透明圈的，則該菌具有分解脂肪的能力，進一步作搖瓶發(fā)酵測定酶活力，挑選產(chǎn)量高者作生產(chǎn)菌種的出發(fā)菌株。

低溫生物菌種的設備

耐低溫菌種的中試設備，冰下水溫適用于3.5度（保持在5度左右），COD、氮和磷的去除率依然非常高，經(jīng)連續(xù)取樣檢測，污水中的COD、總磷和氨氮的降解率分別達 67%、56%和70%.中試非常成功。經(jīng)中試驗證：耐低溫菌種，在水溫3.5度時，微生物活性依舊非常高，各項指標去除率都達到50%以上，是中溫微生物無法比擬的。

                                                                        低溫生物菌種寶藏的目的

       微生物在使用和傳代過程中常常容易發(fā)生污染、變異甚至死掉的情況，因而常常造成菌種的衰變，并有可能使優(yōu)良菌種丟失。因此菌種保藏的重要意義就在于盡可能的保持其原有性狀和活力的穩(wěn)定性，還有確保菌種不死、不變異、不被污染，保持菌株優(yōu)良性狀不退化，保持優(yōu)良菌株存活，以達到便于研究、交換和使用等諸方面的需要。

                                                           低溫生物菌種的控溫方法

1.程序控溫降溫法，應用電子計算機程序控制降溫裝置，可以穩(wěn)定連續(xù)降溫，能很好地控制降溫速率。

從液氮罐中取出安瓿管或塑料凍存管，應立即放置在38℃-40℃水浴中快速復蘇并適當搖動。直到內(nèi)部結冰全部溶解為止，一般約需50秒-100秒。開啟安瓿管或塑料凍存管，將內(nèi)容物移至適宜的培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)。