ELISA定量測定

ELISA操作步驟復雜，影響反應因素較多，特別是固相載體的包被難達到各個體之間的一致，因此在定量測定中，每批測試均須用一系列不同濃度的參考標準品在相同的條件下制作標準曲線。測定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA，標準曲線的范圍一般較寬，曲線zui高點的吸光度可接近2.0，繪制時常用半對數(shù)值，以檢測物的濃度為橫坐標，以吸光度為縱坐標，將各濃度的值逐點連接，所得曲線一般呈S形，其頭、尾部曲線趨于平坦，中央較呈直線的部分是相對理想的檢測區(qū)域。

測定小分子量物質(zhì)常用競爭法，其標準曲線中吸光度與受檢物質(zhì)的濃度呈負相關(guān)。標準曲線的形狀因試劑盒所用模式的差別而略有不同。ELISA測定的標準曲線注意圖中橫坐標為對數(shù)關(guān)系，這更有利于測定系統(tǒng)的表達。

EXBio的T淋巴細胞增殖反應檢測試劑盒（T-cell BlastoFlowEx Kit）#ED7642 旨在測量活化的全血樣本中T淋巴細胞的增殖反應。 該試劑盒使用抗CD3和抗Ki67抗1體混合物檢測增殖的淋巴細胞。

T淋巴細胞增殖反應檢測試劑盒實驗流程：

1.從培養(yǎng)箱中取出試管，取下并丟棄管蓋。每管中加入25 ul EDTA溶液，混合。

2.在37℃下孵育10分鐘。

3.加入2ml的PBS，混合。400g離心細胞5分鐘，移除上清液。

4.輕輕搖動管子擾亂沉淀。加入2ml的稀釋固定和裂解溶液，混合。室溫下孵育10分鐘。

5.400g離心細胞5分鐘，移除上清液。

6.加入0.5ml稀釋的破膜溶液，混合。室溫下孵育10分鐘。

7.加入2ml的PBS。400g離心細胞5分鐘，移除上清液。

8.加入50 ul的CD3/Ki-67 PE抗1體預混液，混勻，室溫下孵育至少30分鐘。

9.加入2ml PBS。400g離心細胞5分鐘，移除上清液。

10.用0.1-0.3ml的1％甲醛PBS溶液或者稀釋的固定和裂解液（1份固定裂解液液 9份PBS的緩沖液）重懸細胞。在2-8℃下暗室條件下儲存處理后的樣品，直到分析。

RNA病毒檢測試劑盒用于定性檢測和分析RNA病毒和RNA分子，特別適合檢測病毒等此類病毒。

組分1. ConviFlex? RT-Taq Mix的凍干粉包含：MuLV逆轉(zhuǎn)錄酶、Taq聚合酶及dNTP。

其中MuLV逆轉(zhuǎn)錄酶，來自小鼠白血1病病毒（M-MuLV）并經(jīng)過基因修飾。

這里的Taq聚合酶另兼具熱啟動功能。

此Taq酶在室溫下，活性被抗1體所抑制，當溫度達到70°C以上時，才會被完全激1活。

在70°C 以下時，由于Taq酶沒有完全活化，因此實驗不會產(chǎn)生非特異性PCR產(chǎn)物和引物二聚體。熱啟動Taq酶的使用可使PCR具有更高的特異性和靈敏度。

信使RNA（mRNA）早先發(fā)現(xiàn)于1960年，在蛋白質(zhì)合成過程中負責傳遞遺傳信息、直接指導蛋白質(zhì)合成，具有以下特點。 

1.含量低，占細胞總RNA的1%~5%。

2.種類多，可達105種。不同基因表達不同的mRNA。

 3.壽命短，不同mRNA指導合成不同的蛋白質(zhì)，完成使命后即被降解。細菌mRNA的平均半衰期約為1.5分鐘。脊椎動物mRNA的半衰期差異極大，平均約為3小時。

4.長度差異大哺乳動物mRNA長度為5×102~1×105nt原核生物與真核生物的mRNA雖然在結(jié)構(gòu)上有差異，但功能一樣，都是指導蛋白質(zhì)合成的模板。