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在眾多的生物實驗室,分子生物學檢測方法如PCR因其高靈敏度、快速、操作方便等優(yōu)勢已經(jīng)被廣泛應用,不過正是由于它靈敏度極高,微量的污染源都有可能導致檢測結(jié)果的假陽性,所以對環(huán)境污染的控制也極為嚴格。面對眾多的污染源,比如樣本交叉污染、試劑儀器交叉污染、質(zhì)粒污染、PCR擴增產(chǎn)物污染、還有極容易忽視的氣溶膠污染,氣溶膠是由固體或液體小質(zhì)點分散并懸浮在氣體介質(zhì)中形成的膠體分散體系,在空氣與液體面摩擦時,比如在操作時比較劇烈地搖動反應管,開蓋時、吸樣時及污染進樣槍的反復吸樣都可形成氣溶膠而污染。據(jù)計算一個氣溶膠顆粒可含48000拷貝,因而由其造成的污染是一個非常重要而被忽視的污染源。
2.原則上PCR檢驗實驗室應當設置以下區(qū)域:試劑儲存和準備區(qū)、標本制備區(qū)、擴增區(qū)、擴增產(chǎn)物分析區(qū)。根據(jù)使用儀器的功能,區(qū)域可適當合并。若使用實時熒光定量PCR儀且不需要進行后續(xù)產(chǎn)物分析工作,擴增區(qū)、擴增產(chǎn)物分析區(qū)可合并。若使用樣本處理、核酸提取及擴增檢測為一體的自動化分析儀,則標本制備區(qū)、擴增區(qū)、擴增產(chǎn)物分析區(qū)可合并。
通過合理的結(jié)構(gòu)及布置,實現(xiàn)了臨床分子實驗室的分區(qū)要求。各實驗操作區(qū)吊頂內(nèi)具備集中抽風系統(tǒng),使得各操作區(qū)域相對緩沖區(qū)形成相對負壓,各室氣流單向流動,經(jīng)由集中式排風管道外排。設置室間傳遞窗可使樣本模板及試劑單向流動。
化學試劑的保管是實驗室人員的日常工作,需要管理人員有較高的化學試劑知識。一般的化學試劑按照單質(zhì)、無機物、有機物、指示劑等分別存放。無機物和有機物要按照試劑的種類、規(guī)格而分別保管,由于種類和規(guī)格繁多,在這里就不一一贅述了。