將細(xì)胞凍存管由液態(tài)氮中取出，置于室溫回溫，不用水浴溶解。此時(shí)可準(zhǔn)備新鮮培養(yǎng)   基、無(wú)菌15ml離心管、培養(yǎng)瓶。在生物安全柜內(nèi)，直接以少量培養(yǎng)基反復(fù)沖融，使細(xì)胞團(tuán)塊化凍。 先在無(wú)菌15ml離心管中加入5ml培養(yǎng)基，再將化凍的細(xì)胞懸液加入離心管中。以200~300g，3分鐘離心收集細(xì)胞。 倒去上清液，重懸細(xì)胞，移到培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。

細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)可能導(dǎo)致衰老的原因：1.細(xì)胞傳代次數(shù)比較多，一定要控制細(xì)胞傳代次數(shù)！大量擴(kuò)增細(xì)胞，將細(xì)胞進(jìn)行凍存，在必要的時(shí)候重新復(fù)蘇。2.胰酶消化時(shí)間太長(zhǎng)，胰酶消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)容易導(dǎo)致細(xì)胞狀態(tài)不佳以及胞質(zhì)疏松;細(xì)胞傳代時(shí)需要留意胰酶消化的時(shí)間。消化過(guò)度，在消化細(xì)胞時(shí)會(huì)對(duì)細(xì)胞的表面蛋白有較強(qiáng)的損傷，所以消化的時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)，建議使用合適濃度和pH值的消化酶，否則會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞衰老和分化。

細(xì)胞質(zhì)不是凝固靜止的，而是緩緩地運(yùn)動(dòng)著的。在只具有一個(gè)中央液泡的細(xì)胞內(nèi)，細(xì)胞質(zhì)往往圍繞液泡循環(huán)流動(dòng)，這樣便促進(jìn)了細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)，也加強(qiáng)了細(xì)胞器之間的相互聯(lián)系。細(xì)胞質(zhì)運(yùn)動(dòng)是一種消耗能量的生命現(xiàn)象。細(xì)胞的生命活動(dòng)越旺盛，細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)越快，反之，則越慢。細(xì)胞死后，其細(xì)胞質(zhì)的流動(dòng)也就停止了。細(xì)胞中還有一些細(xì)胞器，它們具有不同的結(jié)構(gòu)，執(zhí)行著不同的功能，共同完成細(xì)胞的生命活動(dòng)。這些細(xì)胞器的結(jié)構(gòu)需用電子顯微鏡觀察。在電鏡下觀察到的細(xì)胞結(jié)構(gòu)稱為亞顯微結(jié)構(gòu)。