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低溫生物菌種的技術(shù)規(guī)程
1、安瓿管或凍存管的準(zhǔn)備
預(yù)凍時(shí)一般冷凍速度控制在以每分鐘下降1℃為好、使樣品凍結(jié)到-35℃。
喚醒盛水的低溫生物菌種
目前,保藏中心保存有各類微生物資源5700種、50000余株,用于專利程序的生物材料有1萬余株。那么,數(shù)目龐大的微生物資源,從“清醒”到被“沉睡”經(jīng)歷了什么?
“首先進(jìn)行存活度和純度檢測,然后用基因測定來核實(shí)菌種的正確性,繼而用真空冷凍干燥法或液氮超低溫凍結(jié)法保存菌種?!北2鼐N時(shí)一般兩種方法會互為備份,使用液氮法保存6份,真空法則要備份12個(gè)。
“通過冷凍技術(shù)處理后,細(xì)菌就會處于休眠狀態(tài)。如果要活化使用,則需通過相應(yīng)的培養(yǎng)液進(jìn)行活化,才能恢復(fù)活性?!币愿袷鲜塞}堿為例說,復(fù)活菌種所需的營養(yǎng)為:20%的氯化鈉,酪蛋白、氨基酸、pH值為9等,在適宜的溫度和培養(yǎng)基中,這些沉睡的細(xì)菌便會被重新喚醒。
低溫生物菌種的復(fù)壯定義
菌種的復(fù)壯(rejuvenation):使衰的菌種恢復(fù)原來優(yōu)良性狀。
狹義的復(fù)壯是指在菌種已發(fā)生衰的情況下,通過純種分離和生產(chǎn)性能測定等方法,從衰的群體中找出未衰的個(gè)體,以達(dá)到恢復(fù)該菌原有典型性狀的措施;
廣義的復(fù)壯是指在菌種的生產(chǎn)性能未衰前就有意識的經(jīng)常、進(jìn)行純種的分離和生產(chǎn)性能測定工作,以期菌種的生產(chǎn)性能逐步提高。實(shí)際上是利用自發(fā)突變(正變)不斷地從生產(chǎn)中選種。