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斜面菌種低溫保藏法對(duì)那些菌種能夠使用
此方法是很常用的,廣泛適用于細(xì)菌、酵母菌和霉菌等大多數(shù)微生物菌種的短期保藏及不宜用冷凍干燥保藏的菌種。
此方法的缺點(diǎn)是菌株仍有一定程度的代謝活動(dòng)能力,保藏期短,傳代次數(shù)多,菌種較容易發(fā)生變異和被污染。
正常情況下的保菌期:霉菌和有芽孢的細(xì)菌一般可保存6個(gè)月左右,無(wú)芽孢的細(xì)菌可保存1個(gè)月左右,酵母菌可保存3個(gè)月左右。
微生物菌種需要呼吸嗎?
在任何情況下,只要是活的微生物細(xì)胞,就需要呼吸。只不過(guò)在不同的環(huán)境中和條件下,微生物的呼吸速率也不同。
對(duì)于好氧型異養(yǎng)微生物來(lái)說(shuō),如果溫度、水分、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)供給等條件合適,微生物的生長(zhǎng)繁殖速度非??欤粑俾室卜浅8?。如果外界因素變化,或某個(gè)條件不適合微生物生長(zhǎng),其生長(zhǎng)繁殖速度就會(huì)降低,呼吸速率相應(yīng)下降。
如果是微生物保藏菌種,通常會(huì)限制某些方面的條件來(lái)降低微生物細(xì)胞新陳代謝速率,如低溫、干燥、缺氧、缺乏營(yíng)養(yǎng)等,其外在的表現(xiàn)就是呼吸速率降低。
但不管怎樣的保藏條件,只要是細(xì)胞,就總是會(huì)有新陳代謝活動(dòng)的,也總是會(huì)有呼吸的,只是呼吸速率的高低問(wèn)題。
所以,任何微生物菌種都需要呼吸。
細(xì)菌一般在什么溫度下不能存活?
細(xì)菌一般在什么溫度下不能存活?高至100攝氏度以上,低至-20攝氏度以下。
細(xì)菌也對(duì)人類(lèi)活動(dòng)有很大的影響。一方面,細(xì)菌是許多疾病的病原體,砂眼等疾病都是由細(xì)菌所引發(fā)。
然而,人類(lèi)也時(shí)常利用細(xì)菌,例如乳酪及酸奶和酒釀的制作、廢水的處理等,都與細(xì)菌有關(guān)。在生物科技領(lǐng)域中,細(xì)菌有也著廣泛的運(yùn)用。
細(xì)菌早期是被荷蘭人列文虎克在一位從未刷過(guò)牙的老人牙垢上發(fā)現(xiàn)的,但那時(shí)的人們認(rèn)為細(xì)菌是自然產(chǎn)生的。直到后來(lái),巴斯德用鵝頸瓶實(shí)驗(yàn)指出,細(xì)菌是由空氣中已有細(xì)菌產(chǎn)生的,而不是自行產(chǎn)生,并發(fā)明了“巴氏消毒法”,被后人譽(yù)為“微生物創(chuàng)始人。
如何對(duì)微生物菌種進(jìn)行活化
1 定期移植法的菌種復(fù)蘇較簡(jiǎn)單,直接轉(zhuǎn)接即可;
2 液體石蠟法保存的菌種在復(fù)蘇時(shí),挑取少量菌體轉(zhuǎn)接在適宜的新鮮培養(yǎng)基上,生長(zhǎng)繁殖后,再重新轉(zhuǎn)接一次;
3 沙土管法保存菌種在復(fù)蘇時(shí),在無(wú)菌條件下打開(kāi)沙土管,取部分沙土粒于適宜的斜面培養(yǎng)基上,長(zhǎng)出菌落后再轉(zhuǎn)接一次?;蛉∩惩亮S谶m宜的液體培養(yǎng)基中,增殖培養(yǎng)后再轉(zhuǎn)接斜面;
4 真空冷凍干燥法保存菌種在復(fù)蘇時(shí)先用70%酒精棉花擦拭安瓿上部,將安瓿管頂部燒熱, 用無(wú)菌棉簽沾冷水,在頂部擦一圈,頂部出現(xiàn)裂紋,用挫刀或鑷子頸部輕叩一下,敲下已開(kāi)裂的安瓿管的頂端,用無(wú)菌水或培養(yǎng)液溶解菌塊,使用無(wú)菌吸管移入新鮮培養(yǎng)基上,進(jìn)行適溫培養(yǎng);
5 -80℃ 冰箱凍結(jié)法保存菌種復(fù)蘇時(shí),從冰箱中取出安瓿管或塑料凍存管,應(yīng)立即放置38℃-40℃水浴中快速?gòu)?fù)蘇并適當(dāng)快速搖動(dòng)。直到內(nèi)部結(jié)冰全部溶解為止,約需50秒-100秒。開(kāi)啟安瓿管或塑料凍存管,將內(nèi)容物移至適宜的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)
6 液氮超低溫凍結(jié)法保存菌種復(fù)蘇與-80℃ 冰箱凍結(jié)法保存菌種復(fù)蘇相似,從液氮罐中取出安瓿管或塑料凍存管,應(yīng)立即放置在38℃-40℃水浴中快速?gòu)?fù)蘇并適當(dāng)搖動(dòng)。直到內(nèi)部結(jié)冰全部溶解為止,一般約需50秒-100秒。開(kāi)啟安瓿管或塑料凍存管,將內(nèi)容物移至適宜的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)。