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大腸菌群檢測的關(guān)鍵在于方法的選用,食品中大腸菌群檢測有兩種表示方法。
1、是以100mL(g)檢樣內(nèi)大腸菌群較大可能數(shù)(MPN)表示,檢測方法需使用GB/T 4789.3-2003《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗大腸菌群測定》;
2、以每g(mL)樣品中大腸菌群的MPN值表示,檢測方法需使用GB 4789.3-2016《食品安全國家標準 食品微生物學(xué)檢驗 大腸菌群計數(shù)》。
3、現(xiàn)行食品標準中規(guī)定的大腸菌群指標以“CFU/克或CFU/毫升”為單位的,適用GB 4789.3-2016,故檢測樣品前需根據(jù)產(chǎn)品標準認真選擇方法。
例如,GB/T2717-2003醬油衛(wèi)生標準中對大腸菌群的要求需使用方法一GB/T 4789.3-2003。又如GB/T 2718-2014醬油衛(wèi)生標準中對大腸菌群的要求需使用方法二GB4789.3-2016。
酶底物法相比多管發(fā)酵法、濾膜法的優(yōu)勢特點優(yōu)勢特點:酶底物法為GB5750-2006收錄的用于大腸桿菌檢測標準方法,酶底物法是目前水中大腸桿菌檢測的先進方法,目前以其方便快捷,假陽性低,適用大量樣品快速檢測等優(yōu)點正逐步被國內(nèi)檢測部門所認可。相對于多管發(fā)酵和濾膜法,酶底物法檢測步驟大大減少,而且對實驗環(huán)境要求不高,檢測時間可減少到24小時,在日常水樣監(jiān)測及應(yīng)急監(jiān)測中具有很好的應(yīng)用前景,可及時檢測,預(yù)防,較大限度的減少重大公共安全事故的發(fā)生幾率。
大腸桿菌檢測方法
生化鑒定
生化鑒定常用三糖鐵瓊脂(TSIA)和KIA/MIU(AA -/ -)和IMVC( --)來初步鑒定。Z后鑒定依據(jù)全方面生化反應(yīng),典型的大腸埃希菌的基本生化反應(yīng)特征:TSIA(雙糖鐵)產(chǎn)酸/產(chǎn)氣,產(chǎn)氣、CIT(枸櫞酸鹽)陰性、URE(脲酶)陰性、IDN陽性、MOT(動力) /-、ORN(鳥氨酸) /-。
分子生物學(xué)檢測
致瀉性大腸桿菌是Z早應(yīng)用分子診斷法的一類致病菌。事實上,分子生物學(xué)方法是糞便菌群中致瀉性大腸桿菌不同類型間相互間區(qū)分以及它們與非致病性大腸桿菌之間相區(qū)分的Z普遍、可靠的技術(shù)。目前對致瀉性大腸桿菌的分子生物學(xué)檢測研究,在核酸探針技術(shù)和PCR法兩個方面已經(jīng)獲得了重大進展。