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水中糞大腸菌群的常見檢測方法
1、紙片法
采用紙片、紙膜、膠片等作為培養(yǎng)基載體,將特定的培養(yǎng)基和顯色物質(zhì)附著在上面,通過糞大腸菌群在上面的生長、顯色來測定的方法,即糞大腸菌在紙片培養(yǎng)基上呈紅色菌落,菌落周圍產(chǎn)生黃圈是糞大腸菌分解乳糖產(chǎn)酸使指示劑變色的結(jié)果。
2、酶底物法
將加入酶底物檢測試劑的100ml水樣注入51孔或97孔的定量測量盤中進行密封后培養(yǎng),由于大腸菌群細菌能產(chǎn)生一種β-半乳糖苷酶分解PG使得培養(yǎng)液呈黃色,同時大腸埃希氏菌可以產(chǎn)生葡萄糖醛酸酶分解MUG,培養(yǎng)液將會在波長366nm紫外光下產(chǎn)生熒光反應(yīng)。通過計算有黃色反應(yīng)和熒光反應(yīng)的孔穴數(shù),可對照MPN表查出其代表的糞大腸菌群可能數(shù)水中糞大腸菌群。
酶底物法相比多管發(fā)酵法、濾膜法的優(yōu)勢特點優(yōu)勢特點:酶底物法為GB5750-2006收錄的用于大腸桿菌檢測標準方法,酶底物法是目前水中大腸桿菌檢測的先進方法,目前以其方便快捷,假陽性低,適用大量樣品快速檢測等優(yōu)點正逐步被國內(nèi)檢測部門所認可。相對于多管發(fā)酵和濾膜法,酶底物法檢測步驟大大減少,而且對實驗環(huán)境要求不高,檢測時間可減少到24小時,在日常水樣監(jiān)測及應(yīng)急監(jiān)測中具有很好的應(yīng)用前景,可及時檢測,預(yù)防,較大限度的減少重大公共安全事故的發(fā)生幾率。
酶底物法封膜機安裝校準
①開啟紙板箱,有包裝,以便后再用。
②把設(shè)備放于一個開闊的室內(nèi)空間,前后要有橡膠墊和定量分析盤進出室內(nèi)空間。
③把電源線插頭插進設(shè)備側(cè)面開關(guān)電源的插口,隨后在插進電源插座,開啟全自動封口機按鍵開關(guān),這時全自動封口機剛開始系統(tǒng)自檢升溫,大概等候3分鐘,顯示器顯示“SEA”字眼,全自動封口機就進到常規(guī)工作情況。
1、根據(jù)酶底物法封膜機自動將水樣分派到51孔或是97孔定量分析盤孔中封膜成單獨的孔。
2、培養(yǎng)24小時結(jié)束后,陽性孔數(shù)能夠轉(zhuǎn)化為MPN值,能夠直接讀出數(shù)值。
3、51孔定量分析盤可監(jiān)測每100mL水樣中1-200MPN值。
4、97孔定量分析盤可監(jiān)測每100mL水樣中1-2,419MPN值。
5、全部監(jiān)測流程手工制作時長低于1分鐘。
食品大腸桿菌菌群檢測--平板計數(shù)法
相比于MPN計數(shù)法,平板計數(shù)法更適用于大腸菌群含量較高的食品。但大腸菌群多少算是含量較高呢?國標里沒有明確規(guī)定,但通常認為,產(chǎn)品大腸菌群以100CFU/g(mL)為界,超過這個含量一般認為是含量較高。但具體什么時候選用平板計數(shù)法進行大腸桿菌菌群的檢測,大部分情況還是要看你的產(chǎn)品執(zhí)行的標準。假如產(chǎn)品標準要求大腸菌群含量的單位為CFU/g(mL),那必須選用平板計數(shù)法。若是/g(mL)或者MPN/100g(mL),就應(yīng)選擇MPN計數(shù)法,MPN法具體選用哪版國標此處不再贅述。因此,根據(jù)自己產(chǎn)品的情況選擇適當?shù)臋z測方法。