蛋白質(zhì)晶體板技術(shù)研究

隨著人類基因組計(jì)劃的完成,近年來(lái)生物大分子的結(jié)構(gòu)與功能研究成為生命科學(xué)關(guān)注的熱點(diǎn).晶體學(xué)作為結(jié)構(gòu)生物學(xué)的基礎(chǔ),培養(yǎng)出高質(zhì)量的單晶,對(duì)于蛋白質(zhì),核酸等生物大分子三維空間結(jié)構(gòu)的測(cè)定是至關(guān)重要的.文章分析和總結(jié)了蛋白質(zhì)結(jié)晶的原理,常用的結(jié)晶化方法以及促進(jìn)蛋白質(zhì)結(jié)晶化技術(shù)研究的新進(jìn)展，蛋白質(zhì)的分離純化的各種原理和方法作了簡(jiǎn)要的概述,同時(shí)簡(jiǎn)單的介紹了蛋白質(zhì)結(jié)晶的方法及影響因素。

蛋白結(jié)晶板使用

用于人工和高通量蛋白晶體生長(zhǎng)以及其他生物或有機(jī)晶體生長(zhǎng)的設(shè)備和方法.一微孔板包含多個(gè)單元格,以及一限定微孔板中單元格的邊框.在每個(gè)單元格中至少存在一個(gè)上部開口的孔.單元格中的每個(gè)孔底部可以封閉,或者其底部是開口的,但孔底部由一獨(dú)立部件封閉,其可以為獨(dú)立的膜或板(例如塑料,玻璃或金屬)或一模制部件。

獲得晶體及提高晶體質(zhì)量是蛋白質(zhì)結(jié)晶方法學(xué)中的兩大基本問(wèn)題.為解決這兩個(gè)問(wèn)題,結(jié)構(gòu)生物學(xué)家已發(fā)展了許多方法,其中針對(duì)蛋白質(zhì)本身進(jìn)行分子改造是非常重要的方法之一.通過(guò)蛋白質(zhì)工程技術(shù),如突變,還原化修飾,剪切或刪除構(gòu)象柔性環(huán)區(qū),融合蛋白,復(fù)合物共結(jié)晶,原位蛋白質(zhì)水解等方法對(duì)蛋白質(zhì)本身進(jìn)行分子改造。

蛋白質(zhì)晶體板

因而形核劑的使用對(duì)于難結(jié)晶蛋白或者起始濃度過(guò)低的蛋白質(zhì)結(jié)晶具有重要意義.隨著結(jié)構(gòu)生物學(xué)的發(fā)展,形核劑在蛋白質(zhì)結(jié)晶中的研究仍是結(jié)晶方法學(xué)領(lǐng)域的熱點(diǎn)問(wèn)題.多孔微球?qū)Φ鞍踪|(zhì)分子的吸附作用有利于無(wú)序蛋白質(zhì)分子團(tuán)簇的形成,進(jìn)而促進(jìn)蛋白質(zhì)形核.添加多孔微球不但可以增加結(jié)晶條件篩選數(shù)。

綜述了雜質(zhì)對(duì)蛋白質(zhì)晶體生長(zhǎng)影響研究領(lǐng)域的進(jìn)展情況, 對(duì)可能的雜質(zhì)來(lái)源以及雜質(zhì)對(duì)結(jié)晶過(guò)程的影響進(jìn)行了介紹,重點(diǎn)介紹了和結(jié)晶蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)相似的雜質(zhì)分子的影響, 包括晶體成核、生長(zhǎng)形態(tài)、表面形貌、生長(zhǎng)動(dòng)力學(xué)、質(zhì)量等,以及雜質(zhì)在晶體中的重新分配。