廣州聯(lián)方實驗器材有限公司主營：液相色譜柱，Kinetex色譜柱，Gemini色譜柱，Synergi色譜柱，Luna色譜柱等等。我們不斷追求，通過自身的不斷完善，可以為您提供實驗室和生產(chǎn)需要的玻璃耗材、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、實驗器材、色譜耗材和生物耗材，是quan面的實驗室一體化采購平臺。我們本著嚴(yán)謹(jǐn)、務(wù)實、創(chuàng)新的創(chuàng)業(yè)精神，為您提供價格優(yōu)惠、質(zhì)量保證的產(chǎn)品。我們有及時的送貨服務(wù)，準(zhǔn)確而快捷地滿足您的需要。一旦確定樣品中存在ben丙胺或jia基ben丙胺，便可輕松實現(xiàn)對映體確認(rèn)。

液相色譜柱的使用方法

關(guān)于色譜柱的安裝、維護(hù)、保存以及由色譜柱導(dǎo)致的這樣那樣的色譜故障也是一門學(xué)問。gao效液相色譜柱的正確使用包含：加裝保護(hù)柱，過濾流動相和樣品，凈化樣品，避免過高的柱壓，注意溫度和酸堿度，正確及時的沖洗等。

1.加裝保護(hù)柱

保護(hù)柱的作用是過濾掉來自流動相和樣品的化學(xué)“拉圾”同時也可以有效除去流動相和樣品中的不溶物。盡管現(xiàn)在的色譜儀在流動相吸入口、進(jìn)樣閥后部以及在色譜柱的兩端都裝有1、2μm等不同孔徑的濾器,但濾器只能除去不溶性顆粒而不能除去化學(xué)污染,因此,加裝保護(hù)柱是必要的,特別是在分析中藥、zhong成藥等復(fù)雜混合物和生物樣品時更是保護(hù)分析柱必不可少的措施。42mL/min溫度：室溫檢測：MS/MS(SCIEX4500QTRAP)1。

保護(hù)柱填料應(yīng)與分析柱一致,粒徑可較分析柱大。保護(hù)柱屬消耗品,經(jīng)過一定次數(shù)的樣品分析(50～100次)后,出現(xiàn)柱壓顯著升高或峰形變壞或基線漂移時,應(yīng)考慮更換保護(hù)柱。

2.過濾流動相和樣品

流動相通常由水或緩沖溶液與有ji溶劑混合而成,原則上,所有經(jīng)過色譜柱的流動相均應(yīng)過濾,但在實際操作上應(yīng)視具體情況而有所區(qū)別:當(dāng)有ji溶劑用色譜純級,水用石英亞沸水或其它超純水時,在能確保水和有ji溶劑的質(zhì)量且沒有受到污染時,過濾并無更多實際意義。液相色譜柱基本構(gòu)造柱管、壓帽/卡套、篩板(濾片)、接頭分析型常規(guī)分析柱窄徑柱(1。

當(dāng)流動相中含有緩沖鹽時,則過濾是必要的,如前所述,當(dāng)緩沖溶液放置一段時間(視環(huán)境溫度不同而異,夏季一般不超過48 h,冬季一般不超過一周)后,在使用前還應(yīng)重新過濾。

所配制的樣品試液在注入流路系統(tǒng)前均要經(jīng)0. 45μm ( 0. 22μm則更好)孔徑濾膜過濾。要注意區(qū)分水系和油系,二者不可混用,以防止濾膜溶解而造成污染。

裝流動相的容器和色譜系統(tǒng)中的在線濾器要定期清洗和更換,以避免濾器因過載而起不到過濾作用。

3.凈化樣品

當(dāng)樣品中含有對色譜柱有損害的化學(xué)成分,如產(chǎn)生yong久性吸附的蛋白質(zhì)、糖等有機分子和強吸附性物質(zhì),以及可能對柱填料產(chǎn)生破壞作用的基團(tuán)離子。在進(jìn)樣前應(yīng)盡可能對樣品進(jìn)行分離提純以除去多余雜質(zhì)組分。

4.避免過高柱壓

雖然gao效液相色譜柱能耐受的壓力可達(dá)6000 p si (磅/平方英寸) ,但過高及過大的壓力變化均會縮短色譜柱的壽命,避免的方法是

(1)柱壓過高時,盡可能采用較小的流速,以不超過柱z大允許壓力的一半為宜。

( 2)當(dāng)流速較大時,應(yīng)采取流速梯度的辦法使流速分步到位。

(3)使用手動進(jìn)樣閥時,進(jìn)樣閥的切換要盡可能的快。否則超過20%的壓力沖擊會很快使柱報廢。當(dāng)使用多柱聯(lián)用時,柱切換要避免在高壓下進(jìn)行。

5.注意溫度和酸堿度

一般以硅膠為基質(zhì)的色譜柱z高使用溫度不超過60℃,以低于40℃為宜,特別是在流動相pH接近使用限度時,更應(yīng)降低使用溫度。

溫度過高會加快鍵合相的水解和硅膠的溶解,從而使填料性質(zhì)改變,柱床塌陷,降低柱效,改變峰形。

正確及時的沖洗

開始試驗前,應(yīng)了解柱中當(dāng)前是何種溶劑。對于新色譜柱,如無特殊說明均為評價報告中所用流動相。柱中當(dāng)前溶劑一定要與分析樣品所用流動相互溶,如不能混溶,要用與二者均能相互混溶的第三種溶劑過渡。

Kinetex液相色譜柱- HPLC 和 UHPLC 的核-殼優(yōu)勢

充分發(fā)揮 UHPLC 系統(tǒng)的性能

與市面上傳統(tǒng)的亞 2 μm 級色譜柱相比，Kinetex 1.3 和1.7 μm 核-殼色譜柱具有更高的柱效，可以實現(xiàn)出色的色譜分離度、更高的峰容量和更大的靈敏度，讓您可以從每

次 UHPLC 分析中獲得盡可能多的信息。

保護(hù)色譜柱而性能不下降

將污染物和微粒捕集在 SecurityGuard? ULTRA 保護(hù)柱系統(tǒng)中。

HPLC 和 UHPLC 的升級

在小流量 HPLC 或 UHPLC 系統(tǒng)上，Kinetex 2.6 μm 色譜柱的表現(xiàn)與全多孔亞 2 μm 級色譜柱相當(dāng)，柱效是 5 μm 填料的 3 倍、3 μm 全多孔填料的 2 倍。使用更短的 Kinetex色譜柱顯著提升現(xiàn)有方法的生產(chǎn)率和性能，同時減少溶劑消耗！

廣州聯(lián)方實驗器材有限公司主營：Gemini色譜柱，Synergi色譜柱，Luna色譜柱，美國飛諾美色譜柱，Phenomenex色譜柱等等。我們不斷追求，通過自身的不斷完善，可以為您提供實驗室和生產(chǎn)需要的化學(xué)試劑、玻璃儀器、實驗器材和生物耗材，是全方面的實驗室一體化采購平臺。我們本著嚴(yán)謹(jǐn)、務(wù)實、創(chuàng)新的創(chuàng)業(yè)精神，為您提供價格優(yōu)惠、質(zhì)量保證的產(chǎn)品。我們有及時的送貨服務(wù)，準(zhǔn)確而快捷地滿足您的需要。我曾將已經(jīng)污染過的色譜柱反方向來使用，如果保留時間不是很長，而色譜柱足夠長，還是能使用一段時間的。創(chuàng)業(yè)的路上我們風(fēng)雨同舟，一份耕耘就有一份收獲

常見液相色譜柱性能比較。

常用的'w能柱'填料為'C18'，簡稱'ODS'柱，即十八烷jigui烷鍵合硅膠填料(Octadecylsilyl，簡稱ODS)。這種填料在反相色譜中發(fā)揮著極為重要的作用，它可完成gao效液相色譜大多數(shù)的分析任務(wù)。推薦色譜柱——賽分GP-C18色譜柱正相柱:填料是極性的，官能團(tuán)為,CNqing基、,NH2氨基等。由于C18(ODS)是長鏈烷ji鍵合相，有較高的碳含量和更好的疏水性，對各種類型的生物大分子有更強的適應(yīng)能力

反相色譜是迄今在gao效液相色譜中應(yīng)用廣泛的技術(shù)，主要是因為它適用于分析極大多數(shù)的非極性物質(zhì)和很多的可離子化的及離子化合物。大多數(shù)用于反相色譜的固定相都是天然的疏水物質(zhì)，因此，分析物是按照它們與固定相的疏水相互作用的大小來分離的，含有疏水的機制也能以同樣的保留方式分離。色譜柱的流向不能改變在我們常規(guī)思維中，色譜柱上標(biāo)示的流向是不可改變的，每次使用都要遵循。

按鍵合到基質(zhì)上的官能團(tuán)可分為:

反相柱:填料是非極性的，官能團(tuán)為烷烴。推薦色譜柱——賽分GP-C18色譜柱

正相柱:填料是極性的，官能團(tuán)為,CNqing基、,NH2氨基等。推薦色譜柱——賽分正相色譜柱HP-Amino，

賽分正相色譜柱HP-Cyano等等：

離子交換鍵合相:陽離子官能團(tuán):,推薦色譜柱——HP-SCX強陽離子交換色譜柱

陰離子官能團(tuán):―R4N，季銨基、-氨基等。推薦色譜柱——HP-SAX強陰離子交換色譜柱

( 由于硅膠基質(zhì)的鍵合相只能在pH,2,7.5的范圍內(nèi)使用，而離子交換色譜要求有更寬的pH范圍，因此其基質(zhì)現(xiàn)在仍主要使用聚ben乙烯和二乙烯ben。

) 流動相:反相色譜常用的流動相及其沖洗強度如下: H2O,jia醇yi腈,乙醇,bing醇,異bing醇,si氫fu喃 常用的流動相組成是:jia醇-H2O'和'yi腈-H2O'，由于yi腈的ju毒性，通常優(yōu)先考慮'jia醇-H2O'流動相。 反相色譜中，溶質(zhì)按其疏水性大小進(jìn)行分離，極性越大疏水性越小的溶質(zhì)，越不易與非極性的固定相結(jié)合，所以先被洗脫下來。廣州聯(lián)方實驗器材有限公司主營：液相色譜柱，Kinetex色譜柱，Gemini色譜柱，Synergi色譜柱，Luna色譜柱等等。

流動相的pH對樣品溶質(zhì)的電離狀態(tài)影響很大，進(jìn)而影響其疏水性，所以在分離肽類和蛋白質(zhì)等生物大分子的過程中，經(jīng)常要加入修飾性的離子對物質(zhì)，常用的離子對試劑是三fuyi酸(TFA)，使用濃度為0.1,，使流動相的pH值為2,3，這樣可以有效地抑制氨基酸上α羧基的離介，使其疏水性增加，延長洗脫時間，提高分辨率和分離效果。比表面積大，增加樣品與鍵合相之間的反應(yīng)，增加保存,上樣量和復(fù)雜成分的分離度。

完全離子化的溶質(zhì)，例如強酸或強堿，其在反相鍵合相上的保留值很低，近于死時間流出，不能進(jìn)行分析。根據(jù)離子對色譜的原理將一種與樣品離子電荷(A，)相反的離子(B,)，稱為對離子，加入到流動相中，使其與樣品離子結(jié)合生成弱極性的離子對，即中性締合物，從而增強了樣品的疏水性，加大了保留值，改善了分離效果。對于大分子像蛋白質(zhì)或合成的高聚物，聚合物基質(zhì)的效能比得上陶瓷性基質(zhì)。

      LuxAMP 手性液相色譜柱

色譜柱： Lux 3 μm AMP

規(guī)格： 150 x 3.0mm

貨號： 00F-4751-Y0

流動相： A：5mM 碳酸氫銨，使用氨

水調(diào)整為 pH 11

B：jia醇

流速： 0.42mL/min

溫度： 室溫

檢測： MS/MS (SCIEX 4500 QTRAP)

1. 1S,2R( )-ma黃堿

2. R,R(-)-偽ma黃堿

3. S,S( )-偽ma黃堿

4. 1R,2S(-)-ma黃堿

5. R(-)-ben丙胺

6. R(-)-jia基ben丙胺

7. S( )-ben丙胺

8. S( )-jia基ben丙胺

9. ben丁胺

10. 亞jia基二氧基jia基ben丙胺

11. 亞jia基二氧基jia基ben丙胺

包含在此干擾物研究中但未采用色譜

圖顯示的化合物：

對乙酰氨基酚

阿斯匹林

(±)-氯ben那敏

ka啡因

ben海拉明

右美沙芬

布

(±)-MDA

(±)-MDEA

去氧s上腺素

去jiama黃堿

廣州聯(lián)方實驗器材有限公司主營：Gemini色譜柱，Synergi色譜柱，Luna色譜柱，美國飛諾美色譜柱，Phenomenex色譜柱等等。我們不斷追求，通過自身的不斷完善，可以為您提供實驗室和生產(chǎn)需要的化學(xué)試劑、玻璃儀器、實驗器材和生物耗材，是全方面的實驗室一體化采購平臺。我們本著嚴(yán)謹(jǐn)、務(wù)實、創(chuàng)新的創(chuàng)業(yè)精神，為您提供價格優(yōu)惠、質(zhì)量保證的產(chǎn)品。我們有及時的送貨服務(wù)，準(zhǔn)確而快捷地滿足您的需要。新型配體交換手性柱分為涂敷型和鍵合型兩類，非常適合于對各類氨基酸、羥基酸及氨基醇類化合物的手性拆分，具有分離度高，柱效穩(wěn)定等特點。創(chuàng)業(yè)的路上我們風(fēng)雨同舟，一份耕耘就有一份收獲

液相色譜柱清洗方法

gao效液相色譜是20世紀(jì)60年代后期發(fā)展起來的分離分析技術(shù)，是現(xiàn)代分離測定的重要手段。問世以來，因其具有分離效能高、分析速度快、檢測靈敏度好、能分析高沸點但不能氣化的熱不穩(wěn)定生理活性物質(zhì)的特點而被廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)、及臨床分析。gao效液相色譜柱是消耗品，會隨使用時間或進(jìn)樣的次數(shù)增加，出現(xiàn)色譜峰高降低，峰寬加大或出現(xiàn)肩峰，柱效下降。公司主營：Luna色譜柱，美國飛諾美色譜柱，Phenomenex色譜柱，手性色譜柱，Lux多糖類手性色譜柱等等液相色譜柱選擇方法|液相色譜柱選擇的條件A填料基質(zhì)1。需要定期進(jìn)行徹底清洗和再生，不同的色譜柱清洗方法各不相同比如：

1、反相色譜柱

分別用jia醇:水=90:10，純jia醇（HPLC級），異bing醇（HPLC級），二氯jia烷（HPLC級）等溶劑作為流動相，依次沖洗，每種流動相流經(jīng)色譜柱不少于20倍的色譜柱體積.然后再以相反的次序沖洗。

2、正相色譜柱

分別用正己烷（HPLC級），異bing醇（HPLC級），二氯jia烷（HPLC級），jia醇（HPLC級）等溶劑做流動相，順次沖洗，每種流動相流經(jīng)色譜柱不少于20倍的柱體積(異bing醇粘度大，可降低流速，避免壓力過高).注意使用溶劑的次序不要顛倒，用jia醇沖洗完后，再以相反的次序沖洗至正己烷，所有的流動相必須嚴(yán)格脫水。所以說，方法是沒有錯的，色譜柱受污染時，我們應(yīng)該先想到儀器也污染了。

3、離子交換色譜柱

長時間在緩沖溶液中使用和進(jìn)樣，將導(dǎo)致色譜柱離子交換能力下降，用稀酸緩沖溶液沖洗可以使陽離子柱再生，反之，用稀堿緩沖溶液沖洗可以使陰離子柱再生。

另外，還可以選擇能溶解柱內(nèi)污染物的溶劑為流動相做正方向和反方向沖洗。但再生后的色譜柱柱效是不可能恢復(fù)到新柱的水平的.如果柱子裝反了，可以調(diào)回來，但可能會造成柱內(nèi)擔(dān)體塌陷.在不得已的情況下盡量不要反裝色譜柱。

lux （手性色譜柱）

完整的手性分離方案

從分析到制備級別，簡化手性分離，均是明智的投入！

LUX手性柱和填料通過以下三種方法簡化分離過程：

?獨特和傳統(tǒng)的固定相相結(jié)合，增加手性篩選的成功率

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