蛋白質(zhì)結(jié)晶方法

液-液擴(kuò)散(Liquid–Liquid Diffusion) 這種方法中，蛋白質(zhì)溶液和含有沉淀劑的溶液是彼此分層在一個(gè)有小孔的毛細(xì)管中，一個(gè)測(cè)熔點(diǎn)用的毛細(xì)管一般即可（如圖1.2）。下層是密度大的溶液，例如銨或PEG溶液。如果如MPD被用作沉淀劑，它會(huì)在上層。以1：1混合，沉淀劑的濃度應(yīng)該是所期終濃度的二倍。兩種溶液（各自約5μl）通過(guò)針頭導(dǎo)入毛細(xì)管，先導(dǎo)入下層的。通過(guò)一個(gè)簡(jiǎn)易的搖擺式離心機(jī)去除氣泡。再加入上層，進(jìn)而兩層之間形成一個(gè)明顯的界面，它們會(huì)逐漸彼此擴(kuò)散。 Garc′?a-Ruiz and Moreno（1994）已經(jīng)發(fā)展液-液擴(kuò)散技術(shù)至法。蛋白質(zhì)溶液通過(guò)毛細(xì)力被吸入狹窄的管中，管的一端是封閉的。接著，開放端入置于小容器的凝膠中，凝膠使得管豎直，蛋白質(zhì)溶液與凝膠接觸。含有沉淀劑的溶液被倒在凝膠上，整個(gè)裝置被保存于封閉的盒子以防蒸發(fā)。沉淀劑通過(guò)凝膠和毛細(xì)管的擴(kuò)散時(shí)間可以由毛細(xì)管插入凝膠的深度控制，從而蛋白質(zhì)溶液中即可形成過(guò)飽和區(qū)域，毛細(xì)管底部高而頂部低。這也可作為一個(gè)篩選佳結(jié)晶條件的額外信息。

蛋白質(zhì)晶體板是什么

蛋白質(zhì)晶體結(jié)構(gòu)，對(duì)蛋白質(zhì)晶體用X射線衍射法解出蛋白質(zhì)分子中各原子排列的三維結(jié)構(gòu)。在晶體中各蛋白質(zhì)分子以有序的晶胞形式重復(fù)排列，其形成受蛋白質(zhì)的純度和濃度、pH值、溫度、沉淀劑等影響。由于遺傳工程、同步輻射裝置、探測(cè)和分析技術(shù)、結(jié)晶自動(dòng)化等技術(shù)的飛躍進(jìn)步，已獲得的蛋白質(zhì)晶體結(jié)構(gòu)從“蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫(kù)”中僅有的7個(gè)增加到。為結(jié)構(gòu)生物學(xué)的主要研究對(duì)象，對(duì)了解生物體內(nèi)蛋白質(zhì)的各種生物學(xué)功能、外界各種因子對(duì)細(xì)胞的作用、分子設(shè)計(jì)等方面提供結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。

蛋白結(jié)晶板作用

隨著人類基因組測(cè)序計(jì)劃的完成 ,鑒定細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)表達(dá),結(jié)構(gòu),功能及相互作用方式等成為后基因組時(shí)代的主要目標(biāo)之一.為此 ,需要高通量的蛋白質(zhì)組學(xué)研究的技術(shù)和方法.近年來(lái)出現(xiàn)的表面增強(qiáng)激光解吸 /電離，蛋白質(zhì)芯片技術(shù)是一種操作簡(jiǎn)單 ,方便快捷 ,樣本需要量少 ,敏感性高 ,特異性強(qiáng)的高通量的研究蛋白組學(xué)的方法 ,在蛋白質(zhì)功能分析,標(biāo)志物篩選,研發(fā)等方面具有廣泛的應(yīng)用前景。

蛋白結(jié)晶板

本實(shí)用新型屬于生物化學(xué)儀器設(shè)備,所提供的一種蛋白質(zhì)晶體生長(zhǎng)用可調(diào)式汽相擴(kuò)散法結(jié)晶室,包括結(jié)晶室體和 結(jié)晶室座.結(jié)晶室體上有一蛋白質(zhì)池,蛋白質(zhì)池的底面為圓柱面的一部分,結(jié)晶室座上有兩個(gè)外液池,一中空的汽室板蓋在結(jié)晶室座上使蛋白質(zhì)池和外液池空間相通 形成汽室,外液池上部設(shè)有金屬電極,底部連通進(jìn)出液管.結(jié)晶室座上還有垂直交叉的測(cè)溫孔和通光槽.本實(shí)用新型具有結(jié)構(gòu)新穎緊湊,功能齊全,便于調(diào)整和更換 的優(yōu)點(diǎn)。