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PCR實驗室注意事項
試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣品制備區(qū)設(shè)緊急洗眼器,以保證操作人員的安全。PCR實驗室沒有嚴格的凈化要求,可以根據(jù)用戶的使用情況和資金的投入選擇。
PCR實驗室通風(fēng)系統(tǒng)及壓力控制
PCR實驗室并沒有嚴格的凈化要求,但是為避免各個實驗區(qū)域交叉污染的可能性,宜采用全送全排的氣流組織形式,嚴格控制送、排風(fēng)的比例以保證各實驗區(qū)的壓力要求。
各區(qū)域之間應(yīng)具備單向的實驗工藝流、物流、與氣流,形成單向流程的保護屏障,避免實驗之間的相互干擾,防止氣溶膠擴散對實驗過程造成污染。
PCR實驗室工作基本原則
由于擴增產(chǎn)物僅幾百或幾十堿基對(bp),對紫外線損傷不敏感,因此紫外照射擴增片段必須延長照射時間,好是照射過夜。
不同的工作區(qū)域使用不同的工作服(例如不同的顏色)。工作人員離開各工作區(qū)域時,不得將工作服帶出。
PCR實驗室裝飾
實驗室圍護結(jié)構(gòu)應(yīng)牢固、氣密性好;所有陰陽角宜采用圓弧過渡;墻體內(nèi)壁光潔、不積塵、耐腐蝕、易清洗消毒;地面使用PVC卷材或環(huán)氧樹脂自流坪,材料應(yīng)滿足無縫隙、無滲漏、光潔、耐腐蝕的要求。
PCR實驗室各區(qū)功能及主要設(shè)備
樣品制備區(qū):主要進行樣品的保存、核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加入至擴增反應(yīng)管和測定DNA的合成。本區(qū)主要設(shè)備有冰箱、生物安全柜、離心機、加樣器、振蕩器、恒溫水浴等。
PCR實驗室工作基本原則
不同的工作區(qū)域使用不同的工作服(例如不同的顏色)。工作人員離開各工作區(qū)域時,不得將工作服帶出。
擴增區(qū):主要進行DNA擴增。此外,已制備的DNA模板 (來自樣品制備區(qū))的加入和主反應(yīng)混合液(來自試劑準(zhǔn)備區(qū))制備成反應(yīng)混合液等也可在本區(qū)內(nèi)進行。本區(qū)主要設(shè)備有:擴增儀、冰箱、離心機、加樣器等。