PCR實驗室是分子診斷的基礎，也是進行PCR實驗的必備場所。近些年，分子診斷行業(yè)快速發(fā)展，對PCR的認識又進入到了一個新的階段，但是基于實驗室的基本知識仍然是非常重要的一環(huán)。

PCR實驗室注意事項——標本制備區(qū)

由于在樣本混合、核酸純化過程中可能會發(fā)生氣溶膠所致的污染，可通過在本區(qū)內(nèi)設立正壓條件，避免從鄰近區(qū)進入本區(qū)的氣溶膠污染。

PCR實驗室注意事項——擴增產(chǎn)物分析區(qū)

用過的吸頭也必須放至1 mol/L HCl中浸泡后再放到垃圾袋中按程序處理，如焚燒。由于本區(qū)有可能會用到某些可致基因突變和有毒物質，故應當注意實驗人員的安全防護。

PCR實驗室布局

不同功能的工作區(qū)應是分隔獨立的，各工作區(qū)有明顯的標志，不能直通，如果緊密相連，需安裝物品傳遞窗。前兩區(qū)為擴增前區(qū)，后兩區(qū)為擴增后區(qū)，擴增前區(qū)與擴增后區(qū)應嚴格分開。

PCR實驗室裝飾

實驗室圍護結構應牢固、氣密性好；所有陰陽角宜采用圓弧過渡；墻體內(nèi)壁光潔、不積塵、耐腐蝕、易清洗消毒；地面使用PVC卷材或環(huán)氧樹脂自流坪，材料應滿足無縫隙、無滲漏、光潔、耐腐蝕的要求。

PCR實驗室注意事項

幾個區(qū)域的大小設置情況，試劑準備區(qū)、擴增區(qū)、擴增產(chǎn)物分析區(qū)，空間可以相對小一些，樣品制備區(qū)要放置生物安全柜和低溫冰箱，空間應大一些。

PCR實驗室工作基本原則

實驗室的清潔應當按試劑貯存和準備區(qū)→標本制備區(qū)→擴增區(qū)→擴增產(chǎn)物分析區(qū)的方向進行。不同的實驗區(qū)域應當有其各自的清潔用具以防止交叉污染。

PCR實驗室各區(qū)功能及主要設備

樣品制備區(qū)：主要進行樣品的保存、核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加入至擴增反應管和測定DNA的合成。本區(qū)主要設備有冰箱、生物安全柜、離心機、加樣器、振蕩器、恒溫水浴等。

PCR實驗室原則上為試劑準備區(qū)、樣品制備區(qū)、擴增區(qū)和擴增產(chǎn)物分析區(qū)四個單獨的工作區(qū)域并設有專用走廊，各工作區(qū)域應設緩沖間，工作區(qū)與緩沖間宜安裝連鎖裝置。

PCR實驗室工作基本原則

工作結束后，必須立即對工作區(qū)進行清潔。工作區(qū)的實驗臺表面應當可耐受諸如化學物質的消毒清潔作用。實驗臺表面的紫外照射應當方便有效。

PCR實驗室通風系統(tǒng)及壓力控制

各區(qū)域之間應具備單向的實驗工藝流、物流與氣流，形成單向流程的保護屏障，避免實驗之間的相互干擾，防止氣溶膠擴散對實驗過程造成污染。

PCR實驗室注意事項——試劑儲存和準備區(qū)

貯存試劑和用于標本制備的消耗品等材料應當直接運送至試劑貯存和準備區(qū)，不能經(jīng)過擴增檢測區(qū)，試劑盒中的陽性對照品及質控品不應當保存在該區(qū)，應當保存在標本處理區(qū)。