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水稻白葉枯病、防治水稻條斑病的生物
應(yīng)用:本品是防治水稻白葉枯病、防治水稻條斑病的生物。作用機(jī)理: 解淀粉芽孢桿菌Lx -11基因組中存在表面活性素、桿菌抗D、泛革素代謝合成操縱子序列,該菌株能代謝產(chǎn)生surfactin、bacillomycin D和fengycin等3類脂肽類。誘導(dǎo)植株3個(gè)防衛(wèi)反應(yīng)基因PR-1a、PR-1b、PAL和1個(gè)轉(zhuǎn)導(dǎo)基因NPR1的超量表達(dá),并在處理24 h后達(dá)到值,顯著降低條斑病菌對(duì)水稻植株的侵染。室內(nèi)生物活性測(cè)定: 對(duì)水稻白葉枯病菌的EC50為9.96×105 cfu/mL;田間推薦使用濃度(6×107 cfu/mL)是其EC50的60.2倍。對(duì)條斑病菌的EC50為1.85×106 cfu/mL;解淀粉芽孢桿菌能產(chǎn)生一種對(duì)真菌、病毒等具有抑制作用的物質(zhì)——脂膚。田間推薦使用濃度(6×107 cfu/mL)是其EC50的32.43倍。經(jīng)室內(nèi)活性試驗(yàn)和田間試驗(yàn)表明,防治水稻白葉枯病,在水稻白葉枯病發(fā)病初期,用本品500~650 mL/667 m2,兌水50~60 kg/667 m2噴霧用藥,7~10 d可再用藥1次。防治水稻條斑病,在條斑病發(fā)病初期,用本品500~650 mL/667m2,兌水50~60 kg/667 m2噴霧用藥,7~10 d可再用藥1次。共施藥2次。采用噴霧的方法,噴霧時(shí)要均勻。在用藥劑量范圍內(nèi)對(duì)作物安全,未見藥害發(fā)生。對(duì)捕食天敵、寄生天敵低毒或無影響。
全基因組脫氧核糖核酸(deoxyribonucleicacid,DNA)的提
菌株的鑒定:對(duì)篩選得到的乳酸菌進(jìn)行16S rDNA序列分析,確定其種屬。將活化好的菌液,進(jìn)行菌株的全基因組脫氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid, DNA)的提取[16],然后對(duì)基因組DNA的16S rDNA區(qū)域進(jìn)行PCR擴(kuò)增,上游引物27F序列5′-AGAGTTTGATCCTGGCCTCA-3′,下游引物1492R序列:5′-GGTTACCTTGTTACGACTT-3′,擴(kuò)增片段為1 500 bp。PCR體系50 μL:10×buffer 5 μL;脫氧核糖核苷酸三磷酸(deoxy-ribonucleoside triphosphate, dNTP) 5 μL;上游引物(25 μmol/L)0.5 μL;下游引物(25 μmol/L)0.5 μL;Taq DNA 聚合酶(250 U)0.5 μL;模板DNA 1.5 μL ;ddH2O 37 μL。PCR擴(kuò)增條件為:95 ℃ 3 min;95 ℃ 10 s;55 ℃ 30 s;72 ℃ 1 min;González-Ortiz等[34]研究了解淀粉芽孢桿菌CECT5940和屎腸球菌CECT4515(添加量均為0。72 ℃ 5 min,2~4反應(yīng)步驟進(jìn)行30個(gè)循環(huán)。擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)其純度及濃度,將達(dá)到測(cè)序要求的擴(kuò)增產(chǎn)物送至上海華大基因進(jìn)行測(cè)序,將測(cè)序結(jié)果在美國國立生物技術(shù)信息中心(national center for biotechnology information, NCBI)上BLAST進(jìn)行比對(duì),并確定其種屬。
解淀粉芽孢桿菌兼具3種功能
隨著人們對(duì)動(dòng)物產(chǎn)品的質(zhì)量要求越來越高,在動(dòng)物疾病中應(yīng)用的危害也日趨明確,發(fā)酵技術(shù)逐漸成為解決畜禽疫病和飼用問題的有效途徑之一,微生態(tài)制劑、肽、飼用酶制劑可以作為的補(bǔ)充、替代物,而解淀粉芽孢桿菌兼具此3種功能,所以備受廣大研究者的重視。雖然目前對(duì)其應(yīng)用尚處于初始階段,但已有研究者將新的技術(shù)應(yīng)用于提高其活性物質(zhì)的產(chǎn)生,為其在動(dòng)物生產(chǎn)領(lǐng)域的應(yīng)用奠定了更堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。其原因主要有:1)部分解淀粉芽孢桿菌防效不穩(wěn)定,容易受到環(huán)境影響。
【解淀粉芽孢桿菌活菌及其代謝產(chǎn)物】
【產(chǎn)品特性】
物理性狀:輕微發(fā)酵味棕色粉末
主要成分:解淀粉芽孢桿菌活菌及其代謝產(chǎn)物
【儲(chǔ)存方法】
密封、陰涼、干燥處存放
【用法用量】
1. 發(fā)酵有機(jī)肥:與枯草芽孢桿菌及其他微生物一起使用,建議添加量為300g~500g/噸;
2. 配制有機(jī)肥:用本品1~2kg/畝與農(nóng)家肥、化肥或適量細(xì)土混勻后底施或追施,移栽作物也可穴施可溝施,機(jī)械施肥時(shí),將本品與化肥混勻,可隨化肥施入土壤中,或兌水直接噴灑;
3. 苗床上:每標(biāo)準(zhǔn)苗床用本品5g~10g,與苗床土拌勻后播種;
4. 盆栽花卉:每公斤盆土可用本品1~2克。
【注意事項(xiàng)】
1. 不與殺菌劑、、消毒劑類產(chǎn)品同時(shí)使用;
2. 置于避光陰涼處保存,避免強(qiáng)光暴曬;
3. 開封后未用完的產(chǎn)品應(yīng)及時(shí)扎口密封。