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酶底物法測(cè)定總大腸菌群的影響因素
環(huán)境因素的影響
對(duì)同一水樣在自然環(huán)境下與無(wú)菌室中分別進(jìn)行總大腸菌群和大腸埃希氏菌檢測(cè), 培養(yǎng)時(shí)間為 24 h,培養(yǎng)溫度為( 36 ± 1) ℃ ,水樣在自然環(huán)境下與無(wú)菌室內(nèi)總大腸菌群和大腸埃希氏菌的檢測(cè)值相對(duì)偏差在 10% 以內(nèi),樣品T檢驗(yàn)分析p>0.05,監(jiān)測(cè)值差異不顯著,表明此方法對(duì)實(shí)驗(yàn)環(huán)境是否無(wú)菌沒(méi)有嚴(yán)格的要求。
程控定量封口機(jī)的日常使用及保養(yǎng)
日常使用
1.預(yù)熱:按下機(jī)身背后開(kāi)關(guān),紅燈閃爍,儀器開(kāi)始通電加熱,預(yù)熱通常需要10~20分鐘,根據(jù)儀器所在的室溫不同,預(yù)熱時(shí)間有所差異;
2.過(guò)膜封口:儀器達(dá)到封口溫度,綠燈亮起,此時(shí)可以封口。定量盤(pán)放置在定量板上,盡量撫平后,送至封口處,緩慢往里推送,儀器紅外感應(yīng)器感應(yīng)到定量盤(pán)后會(huì)自動(dòng)進(jìn)樣,待完全封口再取出;
3.封口速率:定量盤(pán)需逐個(gè)封口,請(qǐng)勿因水樣較多,過(guò)于連續(xù)封口進(jìn)樣,避免造成卡機(jī)。過(guò)膜封口完一個(gè)水樣,可稍等十幾秒再進(jìn)樣;
4.停電處理:若在使用的過(guò)程中,發(fā)生短暫性停電,定量盤(pán)卡在封口處,請(qǐng)關(guān)閉電源后,再將定量盤(pán)拽出。因加熱墊仍處于高溫狀態(tài)下,為避免熔化定量盤(pán),請(qǐng)盡快拽出定量盤(pán);
5.卡機(jī)處理:若使用時(shí)發(fā)生定量盤(pán)卡在封口處,無(wú)法自動(dòng)從出口送出的情況,若定量盤(pán)未完全進(jìn)入封口機(jī),可按退出鍵退出,若無(wú)法自動(dòng)退出,則關(guān)閉電源后手動(dòng)拽出定量盤(pán);
6.使用完后,請(qǐng)關(guān)閉電源,再拔下電源線。
食品大腸桿菌菌群檢測(cè)--MPN計(jì)數(shù)法
MPN(most probable number)法:即Z近似數(shù)法,也稱為Z可能數(shù)法,是食品檢驗(yàn)中常用的方法。1915年,McCrady第yi次發(fā)表了用MPN法 (Z大可能數(shù)法) 來(lái)估算細(xì)菌濃度的方法, 這是一種應(yīng)用概率理論來(lái)估算細(xì)菌濃度的方法。
MPN法:利用待測(cè)微生物的特殊生理功能的選擇性來(lái)擺脫其他微生物類(lèi)群的干擾,并通過(guò)該生理功能的表現(xiàn)來(lái)判斷該類(lèi)群微生物的存在和豐度。因?yàn)榧?xì)菌在樣本內(nèi)的分布是隨機(jī)的,所以檢測(cè)細(xì)菌時(shí),可應(yīng)用概率理論計(jì)算菌數(shù),實(shí)驗(yàn)結(jié)果以MPN值表示,但MPN值并不能表示實(shí)際菌落數(shù), 實(shí)際菌落數(shù)有可能落在置信區(qū)間內(nèi)的任何一點(diǎn),MPN值是落在這個(gè)置信區(qū)間內(nèi)概率Z大的一點(diǎn)。