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山東富舜新材料科技有限公司座落在美麗的“泉城”濟(jì)南。公司是集化學(xué)科研、開發(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務(wù)為一體的綜合型企業(yè)。我公司擁有先進(jìn)的生產(chǎn)設(shè)備,完善的產(chǎn)品檢測(cè)手段和質(zhì)量保證體系。山東富舜新材料科技有限公司的誠(chéng)信、實(shí)力和產(chǎn)品質(zhì)量獲得業(yè)界的認(rèn)可。我公司的員工具有較強(qiáng)的責(zé)任感。經(jīng)過多年的發(fā)展,現(xiàn)已形成添加劑、阻燃劑、和化工助劑三大類上百個(gè)品種。公司本著“誠(chéng)信經(jīng)營(yíng)、專注品質(zhì)”的宗旨,參與到激烈的市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)中來,以好的產(chǎn)品質(zhì)量,優(yōu)惠的產(chǎn)品價(jià)格,令人滿意的銷售服務(wù),贏得大家的支持與信賴。山東富舜新材料科技有限公司的誠(chéng)信、實(shí)力和產(chǎn)品質(zhì)量獲得業(yè)界的認(rèn)可。歡迎各界朋友蒞臨參觀、指導(dǎo)和業(yè)務(wù)洽談。
考馬斯亮藍(lán)法測(cè)定蛋白質(zhì)含量流程:
該方法用于大多數(shù)蛋白質(zhì)的定量是比較精que的,但不適用于小分子堿性多肽的定量。如核糖核酸酶或溶菌酶。去污劑的濃度超過0.2%影響測(cè)定結(jié)果。如TritonX-100、SDS、NP-40等。
1.Bradford濃染液的配制:將100mg考馬斯亮藍(lán)G-250溶于50ml 95%乙醇,加入100ml85%的磷酸,然后,用蒸餾水補(bǔ)充至1000ml,此染液放4℃至少6個(gè)月保持穩(wěn)定。
2.標(biāo)準(zhǔn)曲線蛋白質(zhì)樣本的準(zhǔn)備:盡量使用與待測(cè)樣本性質(zhì)相近的蛋白質(zhì)作為標(biāo)準(zhǔn)品,例如測(cè)定抗ti,可用純化的抗ti作為標(biāo)準(zhǔn)。如果待測(cè)樣本是未知的,也可用抗ti作為標(biāo)準(zhǔn)蛋白。通常在20ug—150ug/100ul之間繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
3.將待測(cè)樣本溶于緩沖溶液中,該緩沖溶液應(yīng)與制作標(biāo)準(zhǔn)曲線的緩沖溶液相同(hao用PBS)。
4.按1:5用蒸餾水稀釋濃染料結(jié)合溶液,如出現(xiàn)沉淀,過濾除去。
5.每個(gè)樣本加5ml稀釋的染料結(jié)合溶液,作用5~30min。染液與蛋白質(zhì)結(jié)合后,將由紅色變?yōu)樗{(lán)色,在595nm波長(zhǎng)下測(cè)定其吸光度。注意,顯色反應(yīng)不得超過30min.
6.根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算待測(cè)樣本的濃度。
山東富舜新材料科技有限公司座落在美麗的“泉城”濟(jì)南。公司是集化學(xué)科研、開發(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務(wù)為一體的綜合型企業(yè)。我公司擁有先進(jìn)的生產(chǎn)設(shè)備,完善的產(chǎn)品檢測(cè)手段和質(zhì)量保證體系。用途該品是藍(lán)色食用色素中使用較多的品種,用作食品,藥品和化妝品的著色劑。我公司的員工具有較強(qiáng)的責(zé)任感。經(jīng)過多年的發(fā)展,現(xiàn)已形成添加劑、阻燃劑、和化工助劑三大類上百個(gè)品種。公司本著“誠(chéng)信經(jīng)營(yíng)、專注品質(zhì)”的宗旨,參與到激烈的市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)中來,以好的產(chǎn)品質(zhì)量,優(yōu)惠的產(chǎn)品價(jià)格,令人滿意的銷售服務(wù),贏得大家的支持與信賴。山東富舜新材料科技有限公司的誠(chéng)信、實(shí)力和產(chǎn)品質(zhì)量獲得業(yè)界的認(rèn)可。歡迎各界朋友蒞臨參觀、指導(dǎo)和業(yè)務(wù)洽談。
考馬斯亮藍(lán)沾到皮膚后怎么處理?
考馬斯亮藍(lán)和皮膚中蛋白質(zhì)通過范德華力結(jié)合,反應(yīng)快速,并且穩(wěn)定,無法用普通試劑洗掉。待一兩周左右,皮屑細(xì)胞自然衰老脫落即可無礙。
測(cè)蛋白用的考馬斯亮藍(lán)怎么配的?
測(cè)蛋白用的考馬斯亮藍(lán)配方
稱取考馬氏亮藍(lán)G250(注意不是R250)50mg,加95%乙醇25ml溶解,加85%磷酸50ml,H2O定容到500ml,過濾去除少量未溶解物。4度保存?zhèn)溆谩?
westernblot電泳后,為什么要考馬斯亮藍(lán)染色,直接轉(zhuǎn)膜不行嗎?
WB的膠用考馬斯亮藍(lán)染色,有為了確定你的目的條帶電泳情況目的,還有一個(gè)目的,就是跟用麗春紅染摸一樣的作用,看轉(zhuǎn)膜的效率。也就是看你的目的條帶是否都轉(zhuǎn)移到你的膜上了。
這步染色完全可以省略,一般都可以用預(yù)染Marker來進(jìn)行轉(zhuǎn)膜觀察,另外考馬斯亮藍(lán)與蛋白結(jié)合后,很難再去除。
山東富舜新材料科技有限公司是集化學(xué)科研、開發(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務(wù)為一體的綜合型企業(yè)。我。經(jīng)過多年的發(fā)展,現(xiàn)已形成添加劑、阻燃劑、和化工助劑三大類上百個(gè)品種。歡迎各界朋友蒞臨參觀、指導(dǎo)和業(yè)務(wù)洽談。
亮藍(lán)(Brilliant Blue FCF)別名為食用青色1號(hào)(日),是由苯j(luò)ia醛鄰磺酸與N-乙ji,N-(3-磺基芐基)-苯an縮合后氧化,利用現(xiàn)代的生物技術(shù)制成的食用合成色素。亮藍(lán)是一種人工合成食用染料,外觀為紅紫色均勻粉末或顆粒,有金屬光澤,無臭,亮藍(lán)具有酸性染料的特性,能使動(dòng)物纖維著色??捡R斯亮藍(lán)染色方法馬斯亮藍(lán)染色是用考馬斯亮藍(lán)進(jìn)行蛋白質(zhì)染色的方法。易溶于水(18.7g/100mL,21℃),呈綠光藍(lán)色溶液,溶于乙醇(1.5g/100mL,95%乙醇,21℃)、甘油、丙二醇。耐光、耐熱性強(qiáng)。對(duì)檸檬酸、酒石酸、堿均穩(wěn)定、色澤鮮艷、調(diào)色自然、著色力強(qiáng)、色調(diào)不易受PH值影響。
本品為有金屬光澤,帶紅色的紫色粉末或顆粒,無臭味。易溶于水,呈綠色藍(lán)色溶液 ,溶于乙醇、甘油、丙二醇。耐光、耐熱性強(qiáng)。對(duì)檸檬酸、酒石酸、堿均穩(wěn)定。
鑒別方法
(1)取該品0.1g溶于100mL水中,呈藍(lán)色澄清溶液。
(2)該品微溶于乙醇,不溶于油脂,具有酸性染料的特性,能使動(dòng)物纖維著色。
(3)100mL含有0.001g本品的0.02mol/L銨溶液的吸收波長(zhǎng)為630±2nm。
(4)取該品水溶液,做紙上層析,其主色點(diǎn)的Rf值應(yīng)與標(biāo)準(zhǔn)品相同。
紙上層析條件:
展開劑 ;無水乙醇;氨水(1%)=6:2:3
溫 度 20~25℃
試液濃度 0.g/100mL
試液用量 2μL
展開劑前沿上升限度 160mm