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1.避免長菌夏天易滋生微生物或藻類，長時間如此使用，溶劑過濾頭、管道、脫氣器、比例閥、色譜柱等容易損壞，不僅維護(hù)費(fèi)用高，而且影響實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。小長假儀器長期不使用時，需將使用水相的管道換換，以防止細(xì)菌滋生。2.適當(dāng)使用流動相移動相應(yīng)臨用現(xiàn)配、貼標(biāo)簽、寫有效期、配置日期等。盡量用0.2μ的濾膜過濾含鹽的流動相，用0.45μ的濾膜過濾有機(jī)相，注意溶劑與濾膜的相容性。實(shí)驗(yàn)時要注意梯度變化時流動相的可溶性，不可互溶的溶劑不能直接轉(zhuǎn)換，用異作過渡溶劑。注意緩沖鹽的流動相使用過渡，不直接使用有機(jī)相沖，避免鹽析，并注意清洗泵柱塞桿。對 Ch. P中磷酸肌酸鈉等度純鹽相實(shí)驗(yàn)項目，建議哥哥小姐姐將配置好的流動相放入冰箱冷藏，半天后更換放置到室溫下的新流動相。其它等度條件水與有機(jī)相預(yù)混后上機(jī)，不要與泵比例閥在線混合。

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正確使用在常溫光照條件下，可聚合，緩慢聚合，這種聚合經(jīng)驗(yàn)逐漸沉積在進(jìn)口單向閥的寶石球上，影響泵的精度，因此在使用時要注意：●盡量現(xiàn)用現(xiàn)倒，勤換新。佳棕色瓶子裝，避免陽光直接照射?！癖３智鍧?，灰塵或其它雜質(zhì)可能成為形成聚合物的“凝核”。若閥已被聚合物所粘住，可用熱水-異沖洗管道，也可用超聲波處理，可溶解聚合物。

篩選顆粒進(jìn)入 HPLC系統(tǒng)后，柱子的入口端被篩板擋住，終導(dǎo)致柱子堵塞，表現(xiàn)出系統(tǒng)壓力增大，色譜峰變形。為此，應(yīng)采取多種預(yù)防措施，包括商品儀器本身的操作步驟及各種過濾設(shè)計，努力防止或減少微粒進(jìn)入 HPLC系統(tǒng)，從而延長儀器及色譜柱的使用壽命，提高數(shù)據(jù)的可靠性。HPLC系統(tǒng)中，顆粒物的來源主要有三種：流動相、試樣以及儀器系統(tǒng)各部件的磨損。1、流動相若流動相都是 HPLC級溶劑，則無需對流動相進(jìn)行過濾。由于 HPLC級別的，如、等，在生產(chǎn)工藝過程中均經(jīng)過0.2μ m微孔濾膜過濾。與此類似，不管你是購買的 HPLC級別的水，還是用實(shí)驗(yàn)室的超純水凈化系統(tǒng)配制而成，一步也要經(jīng)過0.2μ m的微孔過濾器。

流相通過0.45μ m的微孔濾膜過濾是去除流動相中所有顆粒的一種有效方法。0.2μ m微孔的濾膜也能用，但就這一應(yīng)用而言，它們并不比0.45μ m的微孔濾膜更有效，過濾速度會更慢，尤其是在實(shí)驗(yàn)室所用試劑和水質(zhì)量不佳的情況下。有人建議，實(shí)驗(yàn)室在編寫其流動相制備標(biāo)準(zhǔn)操作程序(SOPs)時，應(yīng)借鑒國際上同類實(shí)驗(yàn)室的規(guī)定，即：只用 HPLC級液體制備流動相時無需過濾，相反，所有流動相組成在使用前都要過濾。輸液瓶與泵接的輸液管末端入口采用沉式過濾器(一般材料為熔融玻璃砂芯濾板和微孔金屬兩種)。這種濾清器規(guī)格為大于10μ m的微孔物質(zhì)，因此它不能替代流動相過濾步驟，但它可以清除系統(tǒng)內(nèi)的灰塵，保證儲液瓶、輸液管使用的可靠性。

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無過濾相的流動…由于柱塞、密封環(huán)、氣缸體和單向閥等雜質(zhì)顆粒都會磨損，因此，應(yīng)該在流動相中預(yù)先除去任何固體顆粒。好的流動相是在玻璃容器中蒸餾，而通常的過濾方法是濾過，可以使用 Millipore濾膜(0.2μ m或0.45μ m)等過濾器。泵入口處應(yīng)接砂濾棒(或片)。應(yīng)該經(jīng)常清洗或更換輸液泵的濾器。泵用后不能及時清洗移動相中不得含有腐蝕性物質(zhì)，含有緩沖液的流動相不能留在泵中，特別是當(dāng)泵停泵過夜或更久時。若含有緩沖液的流動相留在泵中，可能會析出鹽的微晶，如上述固體顆粒那樣損壞密封環(huán)和柱塞，甚至只是因?yàn)槿芤禾幱陟o止?fàn)顟B(tài)時，會析出。所以，必須用純水將泵完全清洗干凈，然后換成適合于保存色譜柱和有利于泵維護(hù)的溶劑(對于反相鍵合硅膠固定相，可能是或-水)。

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可流動相消失…水泵工作時要注意防止溶劑瓶內(nèi)的流動相被用完，否則泵運(yùn)轉(zhuǎn)也會磨損柱塞、氣缸或密封環(huán)，終造成泄漏。如果沒有流動相的外流，沒有壓力指示怎么辦？也許是泵內(nèi)有大量的氣體，此時可開啟泄壓閥，使泵在較大流量(如5 ml/min)下運(yùn)轉(zhuǎn)，排出氣泡，也可用一個50ml的針筒在泵出口協(xié)助抽氣。另外一個可能的原因是密封環(huán)磨損需要更換。

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下面的圖表是GS-MS在隔板扎針后的測試譜對比，樣品瓶中的溶劑是。黑線為溶劑空白譜圖，藍(lán)色曲線是蓋子正確上緊的譜圖，玫紅色曲線是壓蓋過緊的封蓋。很顯然，將蓋子擰得過緊的試樣會有較多的硅氧烷峰(注意：概率不是100%)，硅氧烷峰更多說明有隔墊碎屑掉入瓶中。用肉眼觀察的樣品瓶未見隔墊碎屑，說明隔墊碎屑很小。當(dāng)蓋正確上緊時，隔板呈現(xiàn)的狀態(tài)為平緩至略凹的狀態(tài)?？梢酝ㄟ^觀察隔板的狀態(tài)判斷蓋子是否正確上緊，從而調(diào)節(jié)蓋子的松緊程度。對手勁比較大的小伙伴，可輕輕一擰，蓋就是太緊了，所以需要特別注意。

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若要正確壓蓋，則需調(diào)整壓蓋裝置。下面是調(diào)整蓋子的方法：先調(diào)整定位螺釘：先旋松鎖緊螺母，再根據(jù)所需松緊來確定螺釘?shù)母叨?如確實(shí)壓蓋松了，就把螺絲高度調(diào)低)，將鎖緊螺母旋到底部鎖定位置。第二，在只依靠定位螺釘也無法調(diào)整壓蓋的情況下，使用內(nèi)六角扳手調(diào)整壓蓋中部的螺釘。若壓力過大，則內(nèi)六角扳手逆時針方向轉(zhuǎn)動，如壓得太緊則順時針方向轉(zhuǎn)動。