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Synthecon INC公司于 1990 年創(chuàng)立,創(chuàng)立者為 NASA 細(xì)胞研究計(jì)劃中的發(fā)明人。得到 NASA 的專利和技術(shù)轉(zhuǎn)移,重新設(shè)計(jì)了專利的 Rotary Cell Culture System (RCCS) ,適用于基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)、研發(fā)和其他臨床的研究上。傳統(tǒng)靜態(tài)細(xì)胞培養(yǎng)是在培養(yǎng)瓶或皿中進(jìn)行的。無(wú)論是細(xì)胞或組織均生長(zhǎng)在二維平面空間并接觸玻璃或塑料表面。這樣的方式會(huì)影響細(xì)胞中基因的表達(dá)且無(wú)法持...
培養(yǎng)容器應(yīng)該以什么速度旋轉(zhuǎn)?
這取決于細(xì)胞聚合體的直徑。當(dāng)容器轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí),細(xì)胞聚合體加速,直到他們到達(dá)沉積速度,而該速度取決于細(xì)胞聚合體的大小。根據(jù)斯托克斯方程,沉降速率隨著細(xì)胞聚合體半徑的平方而增加。因此,隨著聚合體體積上的增加,它們沉降的更迅速,同時(shí)為了防止細(xì)胞聚合體與培養(yǎng)壁的碰撞有必要增加旋轉(zhuǎn)速度。因此,一開始可能以慢速旋轉(zhuǎn)培養(yǎng),例如7rpm,當(dāng)細(xì)胞聚合體在體積上增長(zhǎng)并且變得可見,再增加旋轉(zhuǎn)的速度。
RCCS-3D三維細(xì)胞培養(yǎng)中原代細(xì)胞的分離方法?
凡是來(lái)源于胚胎、組織器1官及外周血,經(jīng)特殊分離方法制備而來(lái)的原初培養(yǎng)的細(xì)胞稱之為原代細(xì)胞。1懸浮細(xì)胞的分離方法組織材料若來(lái)自血液、羊水、胸水或的懸液材料,簡(jiǎn)單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層,這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。2實(shí)體組織材料的分離方法對(duì)于實(shí)體組織材料,由于細(xì)胞間結(jié)合緊密,為了使組織中的細(xì)胞充分分散,形成細(xì)胞懸液,可采用機(jī)械分散法(物理裂解)和消化分離法。
RCCS-3D系統(tǒng)中細(xì)胞分化和3D結(jié)構(gòu)
RCCS-3D具有的低剪切力可以促進(jìn)細(xì)胞緊密附著,促進(jìn)細(xì)胞間聯(lián)系,通過特異性的細(xì)胞粘附分子促進(jìn)細(xì)胞分化,保持高密度細(xì)胞培養(yǎng)的能力;可以直接影響基因表達(dá),或者間接促進(jìn)細(xì)胞間信號(hào)的旁分泌自主分泌。這一過程可使聚集不被剪切力破壞而快速建立和增大。模擬微重力環(huán)境可以促進(jìn)從多種正常的和轉(zhuǎn)化細(xì)胞構(gòu)建肉眼可見的、分化的、組織樣3D 結(jié)構(gòu)(即組織等同物或類器X官),研究范圍包括病毒、人腫X瘤細(xì)胞和其它生物制品(如抗X體、抗原)。