對(duì)于生長(zhǎng)的組織培養(yǎng)液中的細(xì)胞，首先移除培養(yǎng)基，然后加入0.1M HCl處理細(xì)胞。孵育10分鐘并觀察細(xì)胞是否被裂解；如果裂解不充分，接著孵育10分鐘并觀察。以大于600g離心力于室溫離心，收集上清直接用于實(shí)驗(yàn)。臨用前在0.1M HCl中加入0.1%至1%濃度的Triton-x 100可增強(qiáng)細(xì)胞和組織裂解。在這個(gè)濃度范圍內(nèi)，去污劑并不干擾試驗(yàn)的結(jié)合部位，但是會(huì)適度的增加光密度值。含有Triton的樣品需利用標(biāo)準(zhǔn)曲線估計(jì)濃度，為了較精l確的測(cè)定，標(biāo)準(zhǔn)曲線需以相同方式稀釋。取1 mL細(xì)胞培養(yǎng)上清加入10μL濃鹽酸，600g離心力于室溫離心，上清液直接用于實(shí)驗(yàn)測(cè)定分析。

結(jié)果計(jì)算

樣品中cAMP濃度有多種計(jì)算方法。X軸表示cAMP標(biāo)準(zhǔn)品濃度，Y軸表示凈光密度的平均值或者百分比值。

1 樣品和標(biāo)準(zhǔn)品的凈光密度(OD)平均值的計(jì)算：

凈OD平均值 = OD平均值 － NSB孔OD平均值

2 計(jì)算不同梯度濃度標(biāo)準(zhǔn)品的結(jié)合率占較大結(jié)合率(B0孔)的百分比，計(jì)算公式 如下：

百分比值 = (凈OD平均值/ B0孔OD平均值)×100

3 繪制凈OD平均值或百分比值對(duì)cAMP標(biāo)準(zhǔn)品濃度的Logit-Log曲線。通過(guò)插值即可得到樣品中cAMP濃度。

武漢紐斯特生物科技有限公司（WuhanNewEastBiotechonologyCo.Ltd），系美國(guó)生命科學(xué)試劑供應(yīng)商美國(guó)NewEastBio在中國(guó)的子公司。公司位于武漢東湖高新技術(shù)開(kāi)發(fā)區(qū)光谷生物城.美國(guó)NewEastBio專注于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域，主要產(chǎn)品有小分子、ELISA試劑盒、蛋白等。

Elisa生物試驗(yàn)是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡(jiǎn)便，結(jié)果判斷較客觀等因素，已廣泛應(yīng)用在免l疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。ELISA檢測(cè)試劑盒適用于體外定性檢測(cè)人血l清或血漿中的抗人類戊型肝l炎（HEV）病毒 IgM 抗l體ELISA檢測(cè)。

ELISA法是免l疫診斷中的一項(xiàng)新技術(shù)，現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原微生物所引起的傳l染病、寄生l蟲(chóng)病及非傳l染病等方面的免l疫診斷。也已應(yīng)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測(cè)定，根據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果，認(rèn)為ELISA法具有靈敏、特異、簡(jiǎn)單、快速、穩(wěn)定及易于自動(dòng)化操作等特點(diǎn)。不僅適用于臨床標(biāo)本的檢查，而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標(biāo)本,因此，也適合于血l清流行病學(xué)調(diào)查。本法不僅可以用來(lái)測(cè)定抗l體，而且也可用于測(cè)定體液中的循環(huán)抗原，所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫(yī)學(xué)各領(lǐng)域的應(yīng)用范圍日益擴(kuò)大，