1.一體化3D干l細胞擴增系統(tǒng)概述

該一體化3D干l細胞擴增系統(tǒng)是基于三維動態(tài)灌注技術開發(fā)和制造的。是為模擬細胞在體內生長所需的生理微環(huán)境而特別設計。

該一體化3D干l細胞擴增系統(tǒng)已經集成了我們成熟而獨特的三維動態(tài)灌注細胞培養(yǎng)技術。能夠模擬生物體內的三維微環(huán)境進行哺乳動物細胞培養(yǎng)。我們的生物反應器還具有如下獨特的優(yōu)勢。

三維細胞培養(yǎng)支架技術

一體化3D干l細胞擴增系統(tǒng)中的較大特點是培養(yǎng)室內采用了三維細胞培養(yǎng)支架，此支架是運用其專有的3D精密微制造工藝特別設計制造的。該一體化3D干l細胞擴增系統(tǒng)已經集成了我們成熟而獨特的三維動態(tài)灌注細胞培養(yǎng)技術。與一般海綿狀多孔支架材料不同，該支架具有100%的開放且相互連通的小孔，因此，細胞培養(yǎng)液可以容易地流通過支架空隙，從而消除了其他多孔支架經常遇到的營養(yǎng)/廢物交換不暢的問題。該支架的制造材料有可生物降解和非生物降解兩種可供選擇。整個支架是由尺寸均勻的聚合物纖維構成，相鄰層面的纖維90o垂直排列，形成了三維的100%互連的多孔結構.

life 水凝膠中細胞的固定與標記

使用小分子物質，例如熒光標記 phalloidin,核酸染料，活性和毒性檢測試劑，增值檢測試劑等小分子物質進行細胞標記方法，除了在孵育時間上適度延長以便能在水凝膠中充分擴散外，與傳統(tǒng)的 2D 細胞培養(yǎng)方式相同。2D和3D環(huán)境下培養(yǎng)的細胞相比較，諸多生理指標都顯著不同，例如原代小鼠乳l腺管腔上皮細胞（mammaryluminalepithelialcells,MEC）在3D基底膜基質中增殖的時間明顯長于2D培養(yǎng)環(huán)境。所培養(yǎng)的細胞如果經基因修飾還有熒光蛋白，則可直接用于觀測，因凝膠完全透明不影響觀測結果。如果使用抗l體等大分子對細胞進行標記則不能直接在水凝膠中開展，因水凝膠的孔徑原因，不適合直接抗l體標記，需要使用 dextranase 將細胞從水凝膠中釋放出來，如果擔心細胞在操作過程中細胞生理活動波動，則可經在凝膠中將細胞固定后在進行操作。