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廣州碩譜生物科技有限公司,反相SPE柱,是目前國(guó)內(nèi)生產(chǎn)SPE小柱較好的生產(chǎn)廠家?;钚蕴抗滔噍腿≈?yīng)商
反相萃取分離主要是利用固相萃取材料官能團(tuán)與目標(biāo)化合物碳?xì)滏I之間的非極性作用力。反相非極性的 SPE柱通常更適合從極性基質(zhì)中提取分離出非極性和中等極性的目標(biāo)化合物。對(duì)利用非極性作用力吸附于非極性 SPE柱的目標(biāo)化合物,可用氯i仿、環(huán)i己烷、乙i酸乙i酯等具有非極性的溶劑洗脫。當(dāng)溶劑的洗脫強(qiáng)度足夠大,可以使目標(biāo)化合物與吸附劑非極性基團(tuán)間的范德華力不受影響時(shí),使其在 SPE柱中順利洗脫。即使是極性更強(qiáng)的甲i醇,對(duì)許多化合物而言,也有足夠的非極性力量來洗脫它。有時(shí)候,單種溶劑無(wú)法完全洗脫疏水性的目標(biāo)化合物,可以考慮使用二氯甲i烷:乙i酸乙i酯(1:1,體積比)。
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對(duì)典型的硅膠基質(zhì)鍵合反相柱體,在不使用緩沖液的情況下,建議采用下列清洗溶劑系列:甲i醇---乙晴---75%乙晴/25%異丙i醇---異丙i醇---二氯甲i烷---己烷;每種溶劑至少?zèng)_洗10個(gè)柱體,分析柱的洗滌流速為250 mm×4.6 mm。zui終以10柱體積異丙i醇過渡,然后返回到原始流動(dòng)相(不含緩沖鹽),zui后返回到初始流動(dòng)相配置。如使用紫外檢測(cè)器,則應(yīng)避免選擇在紫外區(qū)域有吸收作用的溶劑,否則需要使用大量的溶劑沖洗基線,以使基線穩(wěn)定。四氫呋i喃也是常用的清潔溶劑。如懷疑柱子受到嚴(yán)重污染,也可用二甲亞砜(DMSO)或二甲i基胺與水按50:50的比例混合,用流速低于0.5 ml/min的水沖洗色譜柱。
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選用 SPE柱規(guī)格的原則是,首先要確保 SPE柱的填料具有足夠的容量,以便將目標(biāo)化合物100%保留在柱體上。另外,填料也不易過量。填充物越多,溶劑對(duì)目標(biāo)化合物的洗脫效果就越好。
所以在選擇 SPE柱規(guī)格時(shí),一定要考慮 SPE柱的容量。柱容是指一單位質(zhì)量的填料以主要力保持其質(zhì)量。鍵合型硅膠柱容量一般為1%~5%。
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例如, SPE柱的填料為100 mg,其大容量一般不超過5 mg。該離子交換劑柱容量約為0.5~1.5 meq/g。需要指出的是,由于我們面對(duì)的是多種混合物,除了目標(biāo)化混合物之外,還存在很多干擾。
因此,在選擇柱狀規(guī)格時(shí),必須考慮到目標(biāo)化合物及其在萃取條件下可能吸附的總數(shù)量,而不能只考慮目標(biāo)化合物。另外,即使目標(biāo)化合物未超過柱容量, SPE柱在保留目標(biāo)化合物的同時(shí)也保留了部分干擾物,由于兩者的總量已超過柱容量,其結(jié)果必然是部分目標(biāo)化合物無(wú)法保留在 SPE柱中。所以為安全起見,建議柱容好比目標(biāo)化合物估計(jì)含量高一倍。
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氨基固相萃取柱是以硅膠為基質(zhì)的氨基丙基萃取柱。由于其極性固定相和弱陰離子交換劑能夠通過弱陰離子交換(水溶液)或極性吸附(非極性有機(jī)溶液)而達(dá)到保留性,因而具有雙重作用。
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申請(qǐng):可用于結(jié)構(gòu)異構(gòu)體的分離,可用來去除樣品中磺酸根等強(qiáng)陰離子。
常用來凈化、萃取、濃縮環(huán)境水樣中的污染物,如多環(huán)芳烴、食品中的殘留物,以及生物液體中的和代謝產(chǎn)物。例如:、酸鹽、酞嗪、、染料、芳香油、脂溶性、殺真菌劑、鋤草劑、殺蟲劑、碳水化合物、對(duì)羥基甲酯類、酚類、鄰苯二甲酸酯、類固醇、表面活化劑、、水溶性等的萃取精制凈化。
有兩種保留方式:即離子交換和反向保留。填充物在 pH范圍0-14穩(wěn)定,并有較大的粘結(jié)能力。常用來提取凈化需要大量吸附的生物基質(zhì)(如血漿、尿、膽汁和組織勻漿)中的堿性化合物。
凈化方式的 SPE常用于吸附雜質(zhì),富集方式常用于吸附目標(biāo)物質(zhì), GCB是一種石墨化碳黑,是在惰性氣氛下將炭黑加熱至2700-3000℃烘焙而成,它由六個(gè)碳原子組成平面六角形,層疊而成,對(duì)于芳香平面分子易于嵌入,且吸附能力強(qiáng),對(duì)芳香化合物具有較強(qiáng)的選擇性。
有一些項(xiàng)目,當(dāng)淋洗步驟完成后,直接用一定量的洗脫液,如1 ml洗脫,這個(gè)過程將洗脫和定容集進(jìn)行一步處理,前一步處理必然會(huì)影響洗脫步驟的定量結(jié)果。
就是溶劑互溶問題,當(dāng)淋洗過程中使用的溶劑極性與洗脫溶劑的極性相差很大時(shí),就會(huì)產(chǎn)化分層,洗脫阻力大,洗脫液有被稀釋的危險(xiǎn)等,從而導(dǎo)致洗脫效果不同,從而導(dǎo)致試驗(yàn)結(jié)果失敗。
我們需要知道廠家推薦的pH2-8耐受范圍,是為了保證色譜柱的正常使用壽命,硅膠鍵合相在耐受范圍之外使用,會(huì)導(dǎo)致鍵合相與硅膠基質(zhì)發(fā)生斷裂,從而破壞色譜柱的效率并保持其特性,但我們知道,超過耐受范圍 pH值范圍以外的溶劑對(duì)色譜柱的影響,主要是一個(gè)積累的過程,在溶劑的作用下,逐漸溶解,導(dǎo)致色譜柱的性能發(fā)生變化且不可逆,壽命縮短。