【廣告】
ELISA試劑盒的成分
1 預包被板: 抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 96T
2 酶標記: (30倍濃縮)HRP標記抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 0.4mL x 1
3 標準品: 重組小鼠白介素-6 0.5mL x 2
4 緩沖液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 1
5 標記稀釋液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 1
6 顯色劑: TMB底物液 15mL x 1
7 終止液: 1N硫酸 12mL x 1
8 濃縮洗滌液: (40倍濃縮) 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1 操作說明 1實驗所需器材(但試劑盒沒有提供) (450nm) 微移液管及其吸嘴 量筒及燒杯 去離子水 冰箱(4°C) 坐標紙(log/log) 吸水紙 試管(用于標準品稀釋) 溫育箱(37°C ± 1°C) 洗瓶 (用于洗板) 一次性試劑管(用于濃縮酶標記和顯色劑)
ELISA試劑盒檢測過程中的注意事項
ELISA實驗通用規(guī)則
Elisa試劑盒技術原理
(1). 抗原或的固相化及抗原或的酶標記。
(2). 結合在固相載體表面a的抗原或仍保持其活性。
(3). 酶標記的抗原或既保留其活性,又保留酶的活性。
(4). 受檢標本與固相載體表面的抗原或起反應。再加入酶標記的抗原或,也通過反應而結合在固相載體上。
(5). 此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。
(6). 加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重復性好。以反應為基礎,將抗原、的特異性反應與酶對底物的有效催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。
Elisa試劑盒有哪些需要注意的?
1. 跟著病況的進展或由其他因素影響,某些在機體內的含量發(fā)作大幅動搖,因此有必要對標本進行預處理。間接法測定中,標本恰當稀釋還可下降非特異性反響。
2. 加樣一般運用加液器,在ELISA試劑盒中一般有4次加樣:加標本、加酶結合物、加底物和加間斷液。加標本時有必要每份標本運用一支移液器吸嘴,避免交叉污染。加酶結合物、底物和間斷液時則不需更換吸嘴。
3.在成批手藝檢測中,還應留神操作時差的影響。加樣及混勻時間的差異,使抗原反響和酶促反響時間不一致,對競爭法及定量檢測影響很大,不留神可能會導致過錯效果或定量不準。