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低溫生物菌種——制備
也稱種子制備,是指菌種在一定條件下,經過擴大培養(yǎng)成為具有一定數量和質量的純生產菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進一步擴大菌體量及合成產物之用。種子制備包括孢子制備和菌絲體制備(見圖),其中(1)~(4)為孢子制備過程。保存在沙土管或冷凍管中的生產菌種,用無菌手續(xù)挑取少許,接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上,在25℃(或較高溫度)下培養(yǎng)5~7天(或較長時間)。所得孢子還需進一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子,對于霉菌類孢子制備,多數采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基。將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液,接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上,于25~28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產上延續(xù)使用半年左右。菌孢子的培養(yǎng)基大多是采用麩皮或豌豆浸出液、牛肉膏及無機鹽與瓊脂制成的。將斜面孢子接入擴大的扁瓶孢子培養(yǎng)基中,于28~37℃培養(yǎng)5~14天。所獲得的大量孢子可直接作為種子罐 (6)的種子。如果有些生產菌種不產孢子,如產生菌或產孢子不多的,則可采用搖瓶(5)液體培養(yǎng)制得菌絲體,作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應是易于被菌體利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿等),及無機鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐(7)的種子應是生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯,無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%~20%。
低溫生物通用工藝包
生物的產品在不同規(guī)模的小試和中試系統(tǒng)上進行過工藝開發(fā)與連續(xù)生產,已開發(fā)出在多種應用場景下利用吉態(tài)來生物微生物進行生產的通用工藝包。使用過的原料包括:合成氨弛放氣、焦爐煤氣、生物質氣化氣、鋼瓶氣和工業(yè)等。產出的產物包括:飼料蛋白原料(魚粉替代物)、生物油脂(脂肪酸)、生物柴油(脂肪酸甲酯)等大宗原料或產物,以及蛋白酶、DHA等高附加值產物。中試實現連續(xù)運行、穩(wěn)定生產。該通用工藝包采用模塊化設計,其中模塊A為吉態(tài)來生物的產品,B/C/D為對應的發(fā)酵模塊、原料預處理模塊以及產物后處理模塊。工程企業(yè)可直接使用該工藝包進一步優(yōu)化,或在此基礎上為業(yè)主提供工程項目的定制解決方案
低溫生物菌種的應用前景及發(fā)展趨勢
微生物在農業(yè)上的作用已逐漸被人們所認識。國際上已有70多個國家生產、應用和推廣微生物肥料。我國也有250家企業(yè)年產約數十萬噸微生物肥料應用于生產。這雖與同期化肥產量和用量不能相比,但確已開始在農業(yè)生產中發(fā)揮作用,取得了一定的經濟效益和社會效應,隨著相關研究的深入和市場需求的不斷擴大,微生物肥料生產已呈現出規(guī)?;I(yè)生產模式。