什么是熒光顯微鏡？

熒光顯微鏡也是光學顯微鏡的一種，主要的區(qū)別是二者的激發(fā)波長不同。由此決定了熒光顯微鏡與普通光學顯微鏡結構和使用方法上的不同。

熒光顯微鏡是熒光細胞化學的基本工具。它是由光源、濾板系統(tǒng)和光學系統(tǒng)等主要部件組成。是利用一定波長的光激發(fā)標本發(fā)射熒光，通過物鏡和目鏡系統(tǒng)放大以觀察標本的熒光圖像。

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熒光顯微鏡的工作原理

光源多采用200W的超高壓燈作光源，它是用石英玻璃制作，中間呈球形，工作時由兩個電極間放電，引起蒸發(fā)，球內氣壓迅速升高，當完全蒸發(fā)時，可達50~70個標準大氣壓力，這一過程一般約需5~15min。超高壓燈的發(fā)光是電極間放電使分子不斷解離和還原過程中發(fā)射光量的結果。它發(fā)射很強的紫外和藍紫光，足以激發(fā)各類熒光物質，因此，為熒光顯微鏡普遍采用。

超高壓燈也散發(fā)大量熱能。因此，燈室必須有良好的散熱條件，工作環(huán)境溫度不宜太高。

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熒光顯微鏡——聚光鏡

專為熒光顯微鏡設計制作的聚光器是用石英玻璃或其他透紫外光的玻璃制成。分明視野聚光器和暗視野聚光器兩種。還有相差熒光聚光器。

1.明視野聚光器 

在一般熒光顯微鏡上多用明視野聚光器，它具有聚光力強，使用方便，特別適于低、中倍放大的標本觀察。

2.暗視野聚光器 

暗視野聚光器在熒光顯微鏡中的應用日益廣泛。因為激發(fā)光不直接進入物鏡，因而除散射光外，激發(fā)光也不進入目鏡，可以使用薄的激發(fā)濾板，增強激發(fā)光的強度，壓制濾板也可以很薄，因紫外光激發(fā)時，可用無色濾板(不透過紫外)而仍然產生黑暗的背景。從而增強了熒光圖像的亮度和反襯度，提高了圖像的質量，觀察舒適，可能發(fā)現亮視野難以分辨的細微熒光顆粒。

3.相差熒光聚光器 

相差聚光器與相差物鏡配合使用，可同時進行相差和熒光聯合觀察，既能看到熒光圖像，又能看到相差圖像，有助于熒光的定位準確。一般熒光觀察很少需要這種聚光器。

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