廣州碩譜生物科技有限公司丙磺酸SPE柱品牌

SPE小柱的應(yīng)用原理

固相萃取(SPE)技術(shù)是隨著樣品預(yù)處理要求的逐漸提高而被廣泛應(yīng)用的。樣品經(jīng)選擇性吸附和洗脫后，進(jìn)行富集分離。通常采用的方法是使液體樣品經(jīng)過吸附劑，保留其中的被測(cè)物質(zhì)，然后選擇適當(dāng)強(qiáng)度的溶劑沖去雜質(zhì)，然后用少量的溶劑對(duì)被測(cè)物質(zhì)進(jìn)行洗脫，從而實(shí)現(xiàn)快速分離、凈化和濃縮。還可以選擇性地吸附干擾雜質(zhì)，讓被測(cè)物質(zhì)外流；或者同時(shí)吸附雜質(zhì)和被測(cè)物質(zhì)，再用適當(dāng)?shù)娜軇┻x擇性地洗脫。

硅填料的粘接和封尾意味著什么？

硅膠填充物是不衍生的硅膠，通常作為所有硅膠結(jié)合相的基體。

在純硅膠 Si表面的親水硅醇基通過硅1烷化反應(yīng)，形成疏水性烷1基或芳香基基團(tuán)，從而改變填料的極性。例如，C18填料是將十八烷1基的長(zhǎng)鏈與硅膠表面連接。

硅膠鍵合相中存在一定數(shù)量的未反應(yīng)硅醇基，從而導(dǎo)致次生相互作用。這種次生相互作用對(duì)于提取或保留強(qiáng)極性物或污染物十分有用，但對(duì)分析物的吸附也可能是不可逆轉(zhuǎn)的。為減小未反應(yīng)硅醇基的影響，通常是在鍵合反應(yīng)之后，用封端劑鈍化填料，這個(gè)過程稱為封尾。

近年來，固相萃取小柱應(yīng)用得到快速發(fā)展，已廣泛應(yīng)用于食品、環(huán)境、制藥等行業(yè)，成為樣品前處理凈化的有效手段之一。可是，用戶在使用固相萃取小柱過程中也會(huì)遇到各種各樣的問題。小析姐根據(jù)小伙伴們們多年的實(shí)驗(yàn)應(yīng)用經(jīng)驗(yàn)的交流，現(xiàn)將使用過程中常見問題及解決辦法整理在一起，方便大家輕松應(yīng)對(duì)固相萃取常見問題

植物油中9種抗1氧化劑檢測(cè)——SPE法

SPE凈化步驟

SPE柱：Welchrom?  PS/DVB          

規(guī)格: 500mg/6mL

活化：5mL 甲1醇 ，5mL 乙1腈平衡，棄去

上樣：待凈化液全部上樣，收集

洗脫：10mL 甲1醇：乙1腈 （1:2）洗脫，收集

濃縮：合并收集液于旋蒸瓶中，40°C 下旋干，并用乙1腈復(fù)溶，定容到 2mL，過 0.22μm 濾膜，上機(jī)

注意事項(xiàng)：

加標(biāo)過程：在1g油樣中精1確加入0.2mL 100μg/mL 9 種抗1氧化劑混標(biāo)，樣品加標(biāo)量為20mg/kg，上機(jī)濃度為 10μg/mL

液相色譜條件

色譜柱：月旭Ultimate? XB-C18，5μm，4.6×250mm

流動(dòng)相：A：0.5%甲酸水溶液；B：甲1醇

流速： 1mL/min

進(jìn)樣量：5μL

柱溫：35℃

檢測(cè)波長(zhǎng)：280nm

固相萃取柱廣泛應(yīng)用于食品、農(nóng)產(chǎn)品、環(huán)境、生物產(chǎn)品樣品的前處理，主要起到凈化、分離、濃縮作用。內(nèi)部的篩板和填料是關(guān)鍵，外形類似注射1器。相信每個(gè)人都會(huì)疑惑，為什么我的實(shí)驗(yàn)回收率不高？明明前處理并不麻煩，只是過一小柱啊，為什么回收率會(huì)低呢？那么問題來了，是不是應(yīng)該用固相萃取柱呢？包裝、規(guī)格、型號(hào)是否受到關(guān)注？

簡(jiǎn)單明了地介紹一下，什么是固相小柱。

固相萃取小柱是一種用途廣泛而且越來越受歡迎的樣品前處理技術(shù)。大多數(shù)用來處理液體樣品。萃取、濃縮和凈化其中的半揮發(fā)性和不揮發(fā)性化合物；也可用于固體樣品，但必須先把固體樣品處理成液體。

對(duì)于一根常用的C18柱，拿到一根新柱的時(shí)候應(yīng)該怎樣進(jìn)行活化及維護(hù)？為什么要這樣做？

答：新柱活化，實(shí)際上是一個(gè)平衡的過程，除了用流動(dòng)相平衡外，有時(shí)候還必須用所測(cè)樣品對(duì)新柱進(jìn)行平衡，特別是測(cè)定分子量比較高的多肽，尤其重要。因?yàn)榉肿恿扛叩奈镔|(zhì)分子，擴(kuò)散速度慢，平衡所需時(shí)間也相應(yīng)較長(zhǎng)。具體平衡方式也很簡(jiǎn)單，多進(jìn)幾次樣品，直到峰面積和保留時(shí)間穩(wěn)定，再進(jìn)行正式進(jìn)樣測(cè)定。