福爾0馬林-丙酸-酒精固定液(FPA)福爾0馬林5ml 丙酸5ml 50%酒精90ml固定一般的植物組織,通常固定24h,可長久保存。2.24.3 酒精-醋酸-固定液(卡諾固定液)配方Ⅰ:純酒精3份 冰醋酸1份配方Ⅱ:純酒精6份 冰醋酸1份 3份適用于植物組織和細(xì)胞學(xué)材料,為研究細(xì)胞分裂和染色體的優(yōu)良固定液。固定時間不宜過久。

對不同類型的組織應(yīng)適當(dāng)合理地選擇固定液。有的固定液對于組織有膨脹作用。固定劑是一種化學(xué)試劑,有液體和固體之分,一般使用較多的是液體,而固體固定劑如多聚甲醛,則多用于實驗研究的組織固定。固定劑的種類繁多,成份復(fù)雜,對組織的作用不盡相同,英國的組織化學(xué)Pearse指出:對于每個既定的組織化學(xué)方法來說,選擇合適的方法是極為重要:在組織化學(xué)研究準(zhǔn)備階段不論采用什么固定劑,都必須盡可能確切地知道它們對于各種組織成分的反應(yīng)基團的效用。Jones(1973),指出理想的固定劑必須具備的條件是,防止?jié)B透損傷和收縮,以達到在各級可見度的水平皆無形態(tài)變化;要求組織所有的成分能保留于原位。他認(rèn)為有三種試劑即甲醛、和丙稀醛接近于達到上述要求。[4]為了更好地把組織中各種成分盡量保存好,盡量好給予顯示出來,就決不能千篇一律地使用一種固定液,而必須認(rèn)真地深入研究各種固定液的性能和使用方法。例如:,它對組織有明顯的皺縮,硬化作用,平常它是決不會被用來作固定液的,用它不但太浪費,造價太高,而且也使切片較為困難,但是,對于某些酶的研究,腦組織的固定,某些細(xì)胞的培養(yǎng)等。

組織的第二次固定或后固定。在一般的常規(guī)病理活檢組織中,往往用一種固定液,就能夠達到目的,獲得滿意的結(jié)果。但是,對于某些特殊病例光用一種固定液是不夠的,必須根據(jù)不同的情況,使用特殊的固定液再次將組織固定,或者在切片后染色前再行固定。這種方法稱為二次固定或后固定。例如:胚胎性橫紋肌肉瘤,由于細(xì)胞發(fā)育較幼稚,完全不象成熟的橫紋肌組織所固有的橫紋,在進行特殊染色前,就必須用Zenker氏固定液進行第二次固定,方能較好地顯示出橫紋肌纖維來。否則,效果不佳。另外,電鏡固定的標(biāo)本,通常都需要后固定。其使用方法是先用固定,再用奧酸固定。