3~5分子的生物素與1分子的蛋白結(jié)合實驗實驗步驟：

1. 溶解2~10 mg 蛋白于1 ml 的BuphTm磷酸鹽緩沖液中，并計算溶解的毫摩爾數(shù)。如果蛋白含有不恰當(dāng)?shù)木彌_液（如Tris或者甘氨酸），可以通過在PBS中透析或濃縮的方法除去。計算：蛋白質(zhì)量（mg）/蛋白分子量（MW）＝蛋白質(zhì)的毫摩爾數(shù)。

2. 在打開之前，平衡生物素至室溫。加2 mg Sulfo-NHS-Biotin于100 ul 超純水中，加入足夠量濃度的生物素，一般對于10 mg/ml 蛋白來說超過12倍分子數(shù)，對于2 mg/ml 蛋白溶液應(yīng)超過20倍，阿拉丁全線試劑代理，或者該試劑也可以直接以粉末的形式加入蛋白溶液中

3. 室溫30分鐘，或冰上放置2小時。

4. 用30 ml PBS預(yù)洗純化柱，上樣，加入與欲收集量相同的緩沖液，收集0.5 ml 或1 ml 于單獨(dú)的管中。

全自動生化分析儀時，儀器的交叉污染現(xiàn)象是引起實驗結(jié)果偏離的一個原因。由于全自動生化分析儀試劑針需要解除各種試劑，一般難以清洗干凈，所以容易造成分析項目的攜帶污染。而生化項目的測定往往需要僅幾微升樣本，試劑往往需要幾百微升 ，尤其在沒有自動清洗程序的流動池式生化分析儀上，由于前帶現(xiàn)象的存在，如果前一個人標(biāo)本為高值樣本，則接后的個低值標(biāo)本結(jié)果應(yīng)慎重報告。

30年前，我國臨床主要采用固定時間測定酶活性，而近20年我國臨床生化檢測跨越了國外采用分光光度法連續(xù)監(jiān)測酶活性的手工階段，而一步到位引進(jìn)自動生化分析儀采用動力學(xué)法連續(xù)監(jiān)測酶活性。新方法的采用，阿拉丁全線試劑供應(yīng)商，使可分析的酶范圍擴(kuò)大，測定準(zhǔn)確度和精密度提高，為臨床提供更廣泛的信息；同時自動化分析促進(jìn)了酶法對代謝物測定的研究與應(yīng)用，天津阿拉丁全線試劑，許多體內(nèi)的生化反應(yīng)被模擬，過去采用強(qiáng)堿、強(qiáng)酸、火焰等比較激烈的化學(xué)反應(yīng)被摒棄，代之以溫和、快捷、無污染的代謝物酶法測定。

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