HPLC概述

高效液相色譜法(HPLC)是上個世紀七十年代迅速發(fā)展起來的一項高效、快速的分析分離技術，是現代分離測試的重要手段。

色譜法的分離原理是：溶于流動相(mobile phase)中的各組分經過固定相時，由于與固定相(station phase)發(fā)生作用(吸附、分配、排阻、親和)的大小、強弱不同，在固定相中滯留時間不同，高效液相色譜批發(fā)價格，從而先后從固定相中流出。又稱為色層法、層析法。

HPLC是在經典的液相色譜法基礎上發(fā)展起來的，其以液體作為流動相，并采用顆粒極細的高效固定相的柱色譜分離技術。其分離機制與常規(guī)柱色譜相同，但填料更加精細，需高壓泵推動，柱效高，分析速度快。

與氣相色譜不同的是液相色譜中流動相亦參與組分的分離過程，其組成、比例和pH值可靈活調節(jié)，分離模式多樣。在實際操作中主要通過改變流動相的組成來調節(jié)樣品在色譜柱的保留值和選擇性，從而使不同樣品得到分離。

高效液相色譜法的應用范圍十分廣泛，對樣品的適用性廣，不受分析對象揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制，幾乎所有的化合物包括高沸點、極性、離子型化合物和大分子物質均可用高效液相色譜法分析測定，高效液相色譜，因而彌補了氣相色譜法的不足。在目前已知的有機化合物中，可用氣相色譜分析的約占20% ，而80% 則需用高效液相色譜來分析。

HPLC分析流程圖

現代HPLC一般都做成一個個單元組件，然后根據分析要求將各所需單元組件組合起來。

基本的組件是高壓輸液泵、進樣器、色譜柱、檢測器和數據系統(目前基本上為色譜工作站，高效液相色譜哪個牌子好，記錄儀和積分儀已很少見)。

此外，還可根據需要配置流動相在線脫氣裝置、梯度洗脫裝置、自動進樣系統、柱后衍生系統、樣品收集系統和全自動控制系統等。

HPLC的工作過程：輸液泵將流動相以穩(wěn)定的流速(或壓力)輸送至分析體系，在色譜柱之前通過進樣器將樣品導入，流動相將樣品帶入色譜柱，高效液相色譜哪個生產廠家好，在色譜柱中各組分因在固定相中的分配系數或吸附力大小的不同而被分離，并依次隨流動相流至檢測器，檢測到的信號送至數據系統記錄、處理以及保存。

高效液相色譜法

高效液相色譜法自20世紀60年代問世以來，由于使用了高壓輸液泵、全多孔微粒填充柱和高靈敏度檢測器，實現了對樣品的高速、高效和高靈敏度的分離測定。高效液相色譜由于吸取了經典液相色譜的研制經驗，并引入微處理機技術，極大的提高了儀器的自動化水平和分析精度?，F在用微處理機控制的高效液相色譜儀，其自動化程度很高，既能控制儀器的操作參數(如溶劑梯度洗脫、流動相流量、柱溫、自動進樣、洗脫液收集、檢測器功能等)，又能對獲得的色譜圖進行收縮、放大、疊加，以及對保留數據和峰高、峰面積進行處理等，為色譜分析工作者提供了高的效率、功能齊全的分析工具。

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