什么是液相色譜？

液相色譜（liquid chromatography，LC）是一種色譜技術(shù)，用于分離和分析溶液中混合物的化學(xué)成分，以確定是否存在或不存在特定成分，如果存在，則存在多少。我們中的許多人會從上學(xué)開始就熟悉平面LC的形式，在濾紙上打上黑色墨水標(biāo)記，將一端浸入水中，然后觀察墨水中的成分顏色是否分開。但是，分析應(yīng)用中使用的大多數(shù)LC均基于柱色譜法，這將是本文的重點。顧名思義，液相色譜（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）是使用高色譜分辨率進(jìn)行分離的高的性能分析。分離的組分也可以在檢測后使用餾分收集器分離，作為純化的手段。HPLC有多種不同的配置，可用于分離分子量從半揮發(fā)性小分子到幾萬千道爾頓的大蛋白生物分子的溶解組分。液相色譜法是一種非常流行的分析技術(shù)，廣泛用于環(huán)境監(jiān)控，農(nóng)業(yè)領(lǐng)域。

制備型液相色譜簡介

色譜是根據(jù)混合物中各組分的化學(xué)特性對其進(jìn)行分離的一種分離方法。制備型(Prep)色譜或純化色譜則是指利用色譜方法分離出一定量達(dá)到足夠純度的化合物用于后續(xù)實驗或處理的色譜方法?？茖W(xué)家首先要確定目標(biāo)化合物，然后開發(fā)色譜方法，制備液相色譜哪家效果好，將目標(biāo)化合物從原料、副反應(yīng)或其它雜質(zhì)中成功分離出來。其總體目標(biāo)是滿足日益增長的高通量和高的效率需求，同時運用各種純化技術(shù)達(dá)到相應(yīng)的規(guī)模、純度和重現(xiàn)性要求。

從大型制藥企業(yè)到小規(guī)模天然產(chǎn)物研究團(tuán)隊，純化色譜在眾多科研機(jī)構(gòu)中應(yīng)用非常廣泛。盡管應(yīng)用領(lǐng)域各不相同，制備液相色譜哪家便宜，用戶的一般要求卻非常相似，制備液相色譜，他們都希望分離出的終產(chǎn)物純度能達(dá)到95％或更高。

制備液相色譜特點和優(yōu)點

高壓—壓力可達(dá)150~300Kg/cm2。色譜柱每米降的壓為75 Kg/cm2以上。

高速—流速為0.1~10.0 ml/min。

高效—可達(dá)5000塔板每米。在一根柱中同時分離成份可達(dá)100種。

高靈敏度—紫外檢測器靈敏度可達(dá)0.01ng。同時消耗樣品少。

HPLC與經(jīng)典液相色譜相比有以下優(yōu)點：

速度快—通常分析一個樣品在15~30 min，制備液相色譜批發(fā)價格，有些樣品甚至在5 min內(nèi)即可完成。

分辨率高—可選擇固定相和流動相以達(dá)到較好分離效果。

靈敏度高—紫外檢測器可達(dá)0.01ng，熒光和電化學(xué)檢測器可達(dá)0.1pg。

柱子可反復(fù)使用—用一根色譜柱可分離不同的化合物。

樣品量少，容易回收—樣品經(jīng)過色譜柱后不被破壞，可以收集單一組分或做制備。

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