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液相色譜的應(yīng)用
(1)分離混合物液相色譜法只要求樣品能制成溶液,不受樣品揮發(fā)性的限制,流動(dòng)相可選擇的范圍寬,固定相的種類(lèi)繁多,因而可以分離熱不穩(wěn)定和非揮發(fā)性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質(zhì)。通過(guò)與試樣預(yù)處理技術(shù)相配合,液相色譜分析儀,液相色譜法所達(dá)到的高分辨率和高靈敏度,液相色譜分析儀多少錢(qián),可分離并同時(shí)測(cè)定性質(zhì)上十分相近的物質(zhì),能夠分離復(fù)雜混合物中的微量成分。并且隨著固定相的發(fā)展,還可在充分保持生化物質(zhì)活性的條件下完成對(duì)其的分離。
(2)生化分析由于液相色譜法具有高分辨率、高靈敏度、速度快、色譜柱可反復(fù)利用,流出組分易收集等優(yōu)點(diǎn),因而被廣泛應(yīng)用到生物化學(xué)、食品分析、藥的研究、環(huán)境分析、無(wú)機(jī)分析等各種領(lǐng)域,并已成為解決生化分析問(wèn)題有前途的方法。
(3)儀器聯(lián)用液相色譜儀與結(jié)構(gòu)儀器的聯(lián)用是一個(gè)重要的發(fā)展方向。液相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)受到普遍重視,如分析氨基甲酸酯多核芳烴等:液相色譜一紅外光譜聯(lián)用也發(fā)展很快,如在環(huán)境污染分析測(cè)定水中的烴類(lèi)等.使環(huán)境污染分析得到新的發(fā)展。
液相色譜和氣相色譜相比較,在以下幾個(gè)方面具有優(yōu)越性
(1)氣相色譜不適用于不揮發(fā)物質(zhì)和對(duì)熱不穩(wěn)定物質(zhì),而液相色譜卻不受樣品的揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制。有些樣品因?yàn)殡y以汽化而不能通過(guò)柱子,熱不穩(wěn)定的物質(zhì)受熱會(huì)發(fā)生分解,也不適用于氣相色譜法。這使氣相色譜法的使用范圍受到了限制。據(jù)統(tǒng)計(jì),目前氣相色譜法所能分析的有機(jī)物,只占全部有機(jī)物的15%~20%。另一方面,液相色譜卻不受樣品的揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制。所以液相色譜非常適合于分離生物、醫(yī)學(xué)有關(guān)的大分子和離子型化合物,不穩(wěn)定的天然產(chǎn)物,液相色譜分析儀哪家質(zhì)量好,種類(lèi)繁多的其它高分子及不穩(wěn)定的化合物。
(2)對(duì)于很難分離的樣品,用液相色譜常比用氣相色譜容易完成分離
(3)和氣相色譜相比,液相色譜對(duì)樣品的回收比較容易,而且是定量的,樣品的各個(gè)組分很容易被分離出來(lái)。因此,在很多場(chǎng)合,液相色譜不僅作為一種分析方法,而且可以作為一種分離手段,用以提純和制備具有中等純度的單一物質(zhì)。在氣相色譜中所分離出的各樣品組分雖也可以回收,但一般都不太方便,液相色譜分析儀報(bào)價(jià),而且定量性差。液相色譜法由于具有這些氣相色譜法不具備的優(yōu)點(diǎn),因此在許多領(lǐng)域得到廣泛的應(yīng)用。
液相色譜理論
發(fā)展簡(jiǎn)況液相色譜法開(kāi)始階段是用大直徑的玻璃管柱在室溫和常壓下用液位差輸送流動(dòng)相,稱(chēng)為經(jīng)典液相色譜法,此方法柱效低、時(shí)間長(zhǎng)(常有幾個(gè)小時(shí))。高效液相色譜法(High performance Liquid Chromatography,HPLC)是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上,于60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來(lái)的。它與經(jīng)典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒小而均勻,小顆粒具有高柱效,但會(huì)引起高阻力,需用高壓輸送流動(dòng)相,故又稱(chēng)高壓液相色譜法(High Pressure Liquid Chromatography,HPLC)。又因分析速度快而稱(chēng)為高速液相色譜法(High Speed Liquid Chromatography,HSLP)。也稱(chēng)現(xiàn)代液相色譜。
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