制備液相色譜的作用

由于液相色譜儀的溶質分子在流動相、靜態(tài)流動相和固定相中的傳質過程而導致的峰展寬。溶質分子在流動相和固定相中的擴散、分配、轉移的過程并不是瞬間達到平衡，實際傳質速度是有限的，這一時間上的滯后使色譜柱總是在非平衡狀態(tài)下工作，從而產(chǎn)生峰展寬.液相色譜儀的靈敏度高，分析速度快，操作方便等優(yōu)點，但是受技術條件的限制，沸點太高的物質或熱穩(wěn)定性差的物質都難于應用氣相色譜法進行分析。而液相色譜法，只要求試樣能制成溶液，而不需要氣化，因此不受試樣揮發(fā)性的限制。

使用外力使含有樣品的流動相通過一固定于柱中或平板上、與流動相互不相溶的固定相表面.當流動相中攜帶的混合物流經(jīng)固定相時，液相哪個牌子好，混合物中的各組分與固定相發(fā)生相互作用。 由于混合物中各組分在性質和結構上的差異，與固定相之間產(chǎn)生的作用力的大小、強弱不同，隨著液相色譜儀中流動相的移動，混合物在兩相間經(jīng)過反復多次的分配平衡，使得各組分被固定相保留的時間不同，從而按一定次序由固定相中先后流出。與適當?shù)闹髾z測方法結合，實現(xiàn)混合物中各組分的分離與檢測。

液相色譜儀的構造

液相色譜系統(tǒng)主要由流動相儲液瓶、輸液泵、進樣器、色譜柱、檢測器和記錄儀組成，其整體組成類似于氣相色譜，但是針對其流動相為液體的特點作出很多調(diào)整。液相色譜的輸液泵要求輸液量恒定平穩(wěn)，液相哪家效果好，進樣系統(tǒng)要求進樣便利、切換嚴密。同時，由于液體流動相黏度遠遠高于氣體，為了減低柱壓，液相色譜的色譜柱一般比較粗，長度也遠小于氣相色譜柱。

液相色譜儀分類

      液相色譜儀依據(jù)樣品在固定相和流動相分離過程的物理化學原理，可分為以下五種。

　　1、吸附色譜：

　　用固體吸附劑作固定相，以不同極性溶劑作流動相，依據(jù)樣品中各組分在吸附劑上吸附性能的差別來實現(xiàn)分離。

　　2、分配色譜：

　　用載帶在固相基體上的固定液作固定相，液相價格，以不同極性溶質作流動相，依據(jù)樣品中各組分在固定液上分配性能的差別來實現(xiàn)分離。根據(jù)固定相和液體流動相相對極性的差別，又可分為正相分配色譜和反相分配色譜。當固定相的極性大于流動相的極性時，可稱為正相分配色譜或簡稱正相色譜;若固定相的極性小于流動相的極性時，可稱為反相分配色譜或簡稱反相色譜。

3、離子色譜：

　　用微粒離子交換劑作固定相，液相，以具有一定pH值的緩沖溶液作流動相，依據(jù)離子型化合物中各離子組分與離子交換劑上表面帶電荷基團進行可逆性離子交換能力的差別而實現(xiàn)分離。

　　4、體積排阻色譜：

　　用化學惰性的多孔性凝膠作固定相，按固定相對樣品中各組分分子體積排阻滯作用的差別來實現(xiàn)分離。以水溶液作流動相的體積排阻色譜柱，稱為凝膠過濾色譜;以有作流動相的體積排阻色譜法，稱為凝膠滲透色譜法。

　　5、親和色譜：

　　以在不同基體上，鍵合多種不同特性的配位體作固定相，用具有不同pH值的緩沖溶液作流動相，依據(jù)生物分子與基體上鍵聯(lián)的配位體之間存在特異性親和作用能力的差別，而實現(xiàn)對具有生物活性的生物分子的分離。

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