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離子交換色譜
離子交換色譜,用離子交換樹脂作為固定相,主要用來分離帶電離子的混合物。流動(dòng)相中的組分離子與離子交換樹脂(固定相)上的離子基團(tuán)進(jìn)行可逆交換,這種可交換的離子是陰離子或陽離子。
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制備色譜能當(dāng)分析色譜用嗎?
目前,很多客戶的要求都傾向于買一臺液相能同時(shí)解決制備和分析的所有問題,那就相當(dāng)OK。這樣的客戶大多是科研經(jīng)費(fèi)緊張,好不容易批下來點(diǎn)錢,不想都花在后期純化和分析上,所以盡量二合一。
在我看來,分析液相和制備液相是通用的,只是精度的差別問題。比如,分析的液相一般流速在0.1~10mL/min,活塞的一個(gè)沖程大概是10μL,而普通的制備液相一般都是10~100mL的流速,因此活塞桿的尺寸也會(huì)變大,一個(gè)沖程差不多是100μL;流速的精度相對來說就差了很多。流速大了,管路也相應(yīng)的粗了不少,以降低高流速帶來的背景壓力;但這樣的儀器用于分析的話,柱后的擴(kuò)散現(xiàn)象相當(dāng)?shù)膮柡?,即使在色譜柱上達(dá)到基線分離的兩個(gè)峰,由于柱后擴(kuò)散的作用,到達(dá)檢測器的時(shí)候,差不多又會(huì)合到一起了;另外就是檢測器的差異,主要是檢測池的大小和狹縫的大小不同帶來的靈敏度的不同。制備儀器一般靈敏度是分析的1/20,以保證大量進(jìn)樣后,不會(huì)超過量程太多而平頭,分不清到底分沒分開了。
倒是有個(gè)折中的辦法,就是買分析型的液相,然后接個(gè)半制備的色譜柱。半制備就是直徑一厘米的柱子,流速5mL以內(nèi),高壓制備色譜系統(tǒng)多少錢,因此這個(gè)分析液相能達(dá)到;進(jìn)樣量大約是分析柱的10~20倍,檢測器可能會(huì)平頭,沒關(guān)系,換個(gè)波長,找個(gè)吸收較弱的波長當(dāng)檢測波長就OK了,不是大量制備的話,高壓制備色譜系統(tǒng),我想基本可以滿足需要了。
制備色譜柱如何測柱效?
可以選擇幾種物質(zhì),苯,高壓制備色譜系統(tǒng)報(bào)價(jià),萘、蒽等的衍生物上柱,流動(dòng)相一般用65-80%的甲醇/水,測定后根據(jù)保留時(shí)間計(jì)算塔板數(shù)。由于制備色譜的管路死體積一般比較大,很難得到和供應(yīng)商相同的柱效。建議在制備柱開始使用時(shí)在自己的色譜上測一下柱效,然后定期檢測柱效進(jìn)行以進(jìn)行比較。
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