熒光光譜定量分析

在低濃度時(shí)，溶液的熒光強(qiáng)度與熒光物質(zhì)的濃度成正比：F=Kc。其中，F(xiàn)為熒光強(qiáng)度，c為熒光物質(zhì)濃度，K為比例系數(shù)。這就是熒光光譜定量分析的依據(jù)。

上述關(guān)系不適用于熒光物質(zhì)濃度過(guò)高時(shí)，熒光物質(zhì)濃度過(guò)高，其熒光強(qiáng)度反而降低。原因有：

（1）內(nèi)濾效應(yīng)。一是，當(dāng)溶液濃度過(guò)高時(shí)，溶液中雜質(zhì)對(duì)入射光的吸收作用增大，相當(dāng)于降低了激發(fā)光的強(qiáng)度。二是，濃度過(guò)高時(shí)，入射光被液池前部的熒光物質(zhì)強(qiáng)烈吸收，處于液池中、后部的熒光物質(zhì)，則因受到入射光大大減弱而使熒光強(qiáng)度大大降低；而儀器的探測(cè)窗口通常對(duì)準(zhǔn)液池中部，從而導(dǎo)致檢測(cè)到的熒光強(qiáng)度大大降低。

（2）相互作用。較高濃度溶液中，可發(fā)生溶質(zhì)間的相互作用，產(chǎn)生熒光物質(zhì)的激發(fā)態(tài)分子與其基態(tài)分子的二聚物或其他溶質(zhì)分子的復(fù)合物，愛(ài)丁堡熒光光度計(jì)價(jià)格，從而導(dǎo)致熒光光譜的改變和/或熒光強(qiáng)度下降。當(dāng)濃度更大時(shí)，愛(ài)丁堡熒光光度計(jì)公司，甚至?xí)纬蔁晒馕镔|(zhì)的基態(tài)分子聚集體，導(dǎo)致熒光強(qiáng)度更嚴(yán)重下降。

（3）自淬滅。熒光物質(zhì)的發(fā)射光譜與其吸收光譜呈現(xiàn)重疊，便可能發(fā)生所發(fā)射的熒光被部分再吸收的現(xiàn)象，導(dǎo)致熒光強(qiáng)度下降。溶液濃度增大時(shí)會(huì)促使再吸收現(xiàn)象加劇。

當(dāng)然，熒光強(qiáng)度的影響因素還有溶劑、溫度、pH值、散射光等，在定量分析中需要加以考慮。

熒光光譜定量分析的計(jì)算與其他光譜類(lèi)似，包括標(biāo)準(zhǔn)曲線法、比例法等。

熒光光譜體系間跨越

是處于激發(fā)態(tài)分子的電子發(fā)生自旋反轉(zhuǎn)而使分子的多重性發(fā)生變化的過(guò)程。分子由激發(fā)單重態(tài)跨越到激發(fā)三重態(tài)后，愛(ài)丁堡熒光光度計(jì)報(bào)價(jià)，熒光強(qiáng)度減弱甚至熄滅。含有重原子如碘、等的分子時(shí)，體系間跨越為常見(jiàn)，原因是在髙原子序數(shù)的原子中，電子的自旋與軌道運(yùn)動(dòng)之間的相互作用較大，有利于電子自旋反轉(zhuǎn)的發(fā)生。另外，在溶液中存在氧分子等順磁性物質(zhì)也容易發(fā)生體系間跨越，從而使熒光減弱。

熒光分析

熒光分析就是基于物質(zhì)的光致發(fā)光現(xiàn)象而產(chǎn)生的熒光的特性及其強(qiáng)度進(jìn)行物質(zhì)的定性和定量的分析方法。目前，河北愛(ài)丁堡熒光光度計(jì)，也廣泛地作為一種表征技術(shù)來(lái)研究體系的物理、化學(xué)性質(zhì)及其變化情況，例如生物大分子構(gòu)象及性質(zhì)的研究。

熒光光譜適用于固體粉末、晶體、薄膜、液體等樣品的分析。根據(jù)樣品分別選配石英池（液體樣品）或固體樣品架（粉末或片狀樣品）。

熒光光譜分析可與顯微鏡耦合，獲得微區(qū)分析結(jié)果。熒光是無(wú)損傷、非接觸的分析技術(shù)，還可用于自動(dòng)檢驗(yàn)、批量篩分、遠(yuǎn)程原位分析和分析。

熒光分析的優(yōu)點(diǎn)：（1）靈敏度高；（2）選擇性強(qiáng)；（3）試樣量少、方法簡(jiǎn)單；（4）提供較多的物理參數(shù)。但是也存在應(yīng)用范圍不夠廣泛、對(duì)環(huán)境敏感（干擾因素多）等缺點(diǎn)。

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