熒光分光光度計(jì)基本原理

由氙燈發(fā)出的紫外光和藍(lán)紫光經(jīng)濾光片照射到樣品池中，激發(fā)樣品中的熒光物質(zhì)發(fā)出熒光，熒光經(jīng)過濾過和反射后，Techcomp熒光光度計(jì)公司，被光電倍增管所接受，然后以圖或數(shù)字的形式顯示出來。物質(zhì)熒光的產(chǎn)生是由在通常狀況下處于基態(tài)的物質(zhì)分子吸收激發(fā)光后變?yōu)榧ぐl(fā)態(tài)， 這些處于激發(fā)態(tài)的分子是不穩(wěn)定的，在返回基態(tài)的過程中將一部分的能量又以光的形式放出，從而產(chǎn)生熒光．不同物質(zhì)由于分子結(jié)構(gòu)的不同，其激發(fā)態(tài)能級的分布具有各自不同的特征，這種特征反映在熒光上表現(xiàn)為各種物質(zhì)都有其特征熒光激發(fā)和發(fā)射光譜；，因此可以用熒光激發(fā)和發(fā)射光譜的不同來定性地進(jìn)行物質(zhì)的鑒定。在溶液中，當(dāng)熒光物質(zhì)的濃度較低時(shí)，其熒光強(qiáng)度與該物質(zhì)的濃度通常有良好的正比關(guān)系，即IF=KC，利用這種關(guān)系可以進(jìn)行熒光物質(zhì)的定量分析，與紫外-可見分光光度法類似，熒光分析通常也采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法進(jìn)行。

淺析熒光光譜

無論分子初處于哪一個(gè)激發(fā)單重態(tài)，通過內(nèi)轉(zhuǎn)換及振動(dòng)弛豫，均可返回到激發(fā)單重態(tài)的低振動(dòng)能級，滄州熒光光度計(jì)公司，然后再以輻射形式發(fā)射光而返回至基態(tài)的任一振動(dòng)能級上，Techcomp熒光光度計(jì)公司，這時(shí)發(fā)射的光稱為熒光。由于振動(dòng)弛豫和內(nèi)轉(zhuǎn)換損失了部分能童，愛丁堡熒光光度計(jì)公司，故熒光的波長總比激發(fā)光波長要長。發(fā)射熒光的過程為 秒。由于電子返回基態(tài)時(shí)可以停留在基態(tài)的任一振動(dòng)能級上，因此得到的熒光譜線有時(shí)呈現(xiàn)幾個(gè)非?？拷姆濉Ｍㄟ^進(jìn)一步振動(dòng)弛豫，這些電子都很快地回到基態(tài)的低振動(dòng)能級。

熒光分光光度計(jì)的功能特點(diǎn)

1． 熒光發(fā)射光譜選擇某一固定波長的光激發(fā)樣品，記錄樣品中產(chǎn)生的熒光發(fā)射強(qiáng)度與發(fā)射波長間的函數(shù)關(guān)系，即得熒光發(fā)射光譜。

2． 熒光激發(fā)光譜選定某一熒光發(fā)射波長記錄熒光發(fā)射強(qiáng)度作為激發(fā)光波長的函數(shù)，即得熒光激發(fā)光譜。

3．時(shí)間分辨技術(shù)；可用于對混合物中光譜重疊但有壽命差異的組分進(jìn)行分辨并分別測量。時(shí)間分辨熒光測定公式如下：P(t) = P0 EXP (-t /τ)式中P(t)：擬合指數(shù)函數(shù)P0：強(qiáng)度取值EXP：指數(shù)運(yùn)算符t：時(shí)間取值τ：熒光平均時(shí)間壽命

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