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HPLC對流動相的一般要求
流動相就比如人體的血液,其質(zhì)量直接影響到整個系統(tǒng)的正常運(yùn)行與否。
© 應(yīng)該使用HPLC級的溶劑,不能互相混溶的溶劑不可以直接切換!
© 注意溶劑的截止波長。截止波長是指該溶劑可以在紫外檢測器中使用的很低波長,低于該波長后,溶劑會有很強(qiáng)的紫外吸收,從而影響極限的穩(wěn)定性、干擾對所分析物質(zhì)的檢測。
© HPLC所使用的水必須是新鮮的和經(jīng)過0.45μm濾膜過濾過的。建議每天更換新鮮的水。長期不用時,必須把使用水的管路用有機(jī)的溶劑置換,高效液相色譜費用,防止長霉。
© 儀器使用完后要采用適當(dāng)?shù)娜軇_洗等方法維護(hù)色譜柱和系統(tǒng)。如果使用了緩沖鹽一定先將鹽要沖洗干凈。
© 當(dāng)有流路堵塞時,可以嘗試將之反接后沖洗。污染的溶劑或溶劑瓶里的藻類生長將會縮短溶劑過濾器的使用壽命,并且影響泵和系統(tǒng)的的性能。這在水溶劑或磷酸鹽緩沖液(pH 4 至7) 中尤其如此。
高效液相色譜基線漂移的原因
(1)柱的溫度波動。即使是微小的溫度變化也會導(dǎo)致基線波動。通常影響差異檢測器、電導(dǎo)檢測器、UV檢測器或其它光電類檢測器的較低靈敏度。
(2)高效色譜流動相不均勻流動相條件變化,引起的基線漂移大于溫度變化引起的基線漂移。
(3)污染或氣體循環(huán)池
(4)探測器出口堵塞。(高壓導(dǎo)致循環(huán)水池窗口的爆裂,產(chǎn)生噪聲基線)
(5)不正確的流量比或流量變化
(6)柱的平衡是緩慢的,高效液相色譜哪家便宜,特別是當(dāng)移動相發(fā)生變化時。
(7)由低質(zhì)量的溶劑污染、變質(zhì)或制備。
(8)個樣品具有較強(qiáng)的保留力(高K‘值)至汕頭峰
(9)洗脫樣品,顯示基線逐漸增加?;厥杖軇┎皇褂茫煌茝V.. 探測器未調(diào)整..
高效液相色譜
高效液相色譜與光譜技術(shù)聯(lián)用方法的研究也一直是色譜學(xué)科的研究熱點。20世紀(jì)80年代,可同時得到每個組分HPLC-UV三維譜圖的二極管陣列檢測器(DAD)問世,對紫外-可見光譜的快速掃描檢測,高效液相色譜,使液相色譜能提供的信息大幅度增加,為模式識別等化學(xué)計量學(xué)中的許多手段提供了重要的應(yīng)用領(lǐng)域。90年代以后,高效液相色譜哪個穩(wěn)定性好,HPLC-MS、HPLC-FTIR等色譜-光譜聯(lián)用技術(shù)逐漸成熟,為解決HPLC定性問題提供了多種實用、有效的手段。
為適應(yīng)生命科學(xué)的發(fā)展,以制備色譜為主要對象的非線性色譜獲得了長足的發(fā)展,人們運(yùn)用色譜法已能夠制備微量而貴重的生物活性化合物。而為了滿足天然產(chǎn)物分離制備、生物制藥等方面的需要,大規(guī)模的工業(yè)色譜技術(shù)、模擬移動床色譜技術(shù)得到發(fā)展,目前,日處理量達(dá)到千克級的液相色譜系統(tǒng)已經(jīng)隨處可見。
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