P7的序列：5’-CAAGCAGAAGACGGCATACGAG3’。PCR總體系為：2倍PCRMix15uL，10umol/LP71uL，1umol/LOP1uL或OP2uL，DNA5uL，NFW5uL。上述技術方案中，作為推薦，所述步驟4中的PCR總體系10uL具體為：VAHTSSYBRqPCRMasterMix5uL，qPCRPrimerMix1uL，DNA2uL，ROXReferenceDye2，NFW5uL。上述技術方案中，作為推薦，所述的***輪PCR擴增循環(huán)數(shù)目為10-14。上述技術方案中，河南多組學邁杰轉(zhuǎn)化醫(yī)學NGS平臺創(chuàng)新服務，作為推薦，河南多組學邁杰轉(zhuǎn)化醫(yī)學NGS平臺創(chuàng)新服務，所述的第二輪PCR擴增循環(huán)數(shù)目為10-14。本發(fā)明的優(yōu)點和有益效果在于：提供一種基于多重PCR的二代測序建庫技術。在二代測序過程中采用該技術則不需要再購買商業(yè)的建庫試劑盒，所有反應試劑都可以單獨購買組合，極大的降低了實驗成本。另外由于在PCR過程中固定了一端的通用引物，極大的降低了多重PCR反應體系中的引物種類和數(shù)量，可以有效的抑制非特異性擴增和引物之間的相互干擾，也降低了不同引物間的擴增效率的差異，河南多組學邁杰轉(zhuǎn)化醫(yī)學NGS平臺創(chuàng)新服務。附圖說明為了更清楚地說明本發(fā)明實施例或現(xiàn)有技術中的技術方案，下面將對實施例或現(xiàn)有技術描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹，顯而易見地，下面描述中的附圖**是本發(fā)明的一些實施例，對于本領域普通技術人員來講，在不付出創(chuàng)造性勞動性的前提下，還可以根據(jù)這些附圖獲得其他的附圖。邁杰轉(zhuǎn)化醫(yī)學擁有3D HISTECH Pannoramic MIDI數(shù)字化病理掃描儀及91360遠程病理系統(tǒng)。河南多組學邁杰轉(zhuǎn)化醫(yī)學NGS平臺創(chuàng)新服務

    thermofisherscientific)等。研究發(fā)現(xiàn)，基于pcr-ce分型時，相同片段長度的等位基因中存在重復區(qū)域序列結(jié)構(gòu)不一致的情況。二代測序技術(secondgenerationsequencing，sgs)又稱為下一代測序技術(nextgenerationsequencing，ngs)，具有測序通量高、速度快的優(yōu)點。ngs不僅能從長度多態(tài)性上對str基因座進行分析，還能從序列上發(fā)掘str基因座的遺傳多態(tài)性。隨著ngs測序成本越來越低、測序讀長逐漸的增加，ngs對str分型技術也越來越成熟。近年來，ngs技術已經(jīng)應用于法醫(yī)學str分型研究。相比于pcr-ce分型，ngs技術在y-str基因座的分析中具有很多優(yōu)勢：1、樣本輸入量低，使得微量樣本及降解樣本檢材的分型研究變?yōu)榭赡埽?、準確性高，能夠全部覆蓋基因座的每個堿基并通過產(chǎn)出高測序深度保證y-str基因座各等位基因的高概率精確判斷的嚴謹性；3、能夠獲得y-str等位基因間的核苷酸差異信息，由于**重復結(jié)構(gòu)存在差異或擴增區(qū)段內(nèi)存在變異(側(cè)翼序列的堿基突變或插入缺失)，序列長度相等的等位基因可能是具有遺傳穩(wěn)定性的完全不同的等位基因，這種y-str序列多態(tài)性是個體識別分析的寶貴資源；4、成本低，通過對每個樣本檢材添加標簽一次可以同時對多個樣本進行平行測序。 河北一體化邁杰轉(zhuǎn)化醫(yī)學NGS平臺共同合作邁杰轉(zhuǎn)化醫(yī)學開發(fā)的伴隨診斷試劑盒,基因突變檢測試劑盒,檢測范圍全。

    pcrpurificationkit為德國qiagen公司的產(chǎn)品，產(chǎn)品目錄號為y5-28006。。qubittmdsdnahsassaykit為thermofisher公司的產(chǎn)品，貨號為q32854。truseqdnapcr-freehtlibraryprepkit為illumina公司的產(chǎn)品，產(chǎn)品目錄號為fc-121-3003。kapalibraryquantificationkit為kapa公司的產(chǎn)品，產(chǎn)品目錄號為kk4824。miseqreagentkitv3-600cycles測序試劑為illumina公司的產(chǎn)品，貨號為ms-102-3003。miseqfgx二代測序儀為illumina公司的產(chǎn)品。實施例1、基于二代測序技術檢測68個基因座的試劑盒的制備一、68個基因座的篩選本發(fā)明的發(fā)明人通過查閱文獻和現(xiàn)有二代測序str分型產(chǎn)品獲得大量候選的y-str基因座，然后根據(jù)中國人群str群體遺傳多態(tài)性分析結(jié)果，**終篩選獲得68個基因座，包括67個y-str基因座和1個性別決定amelogenin基因座。

    2005年，羅氏推出了***款二代測序儀羅氏454，生命科學開始進入高通量測序時代。后續(xù)隨著Illumina系列測序平臺的推出，極大降低了二代測序的價格，推動了高通量測序在生命科學各個研究領域的普及。目前，高通量測序已經(jīng)成為一種常規(guī)研究方法，大量科研工作中均會用到。然而，為什么二代測序能實現(xiàn)高通量？為什么二代測序讀長如此之短？為什么reads末端測序質(zhì)量會降低？應該如何選擇測序讀長與打斷片段的長度？想要回答這些問題，都需要詳細了解二代測序的基本原理。本篇文章以典型的Illumina雙末端測序為例，詳細解析二代測序的原理。第二代測序（Next-generationsequencing，NGS）又稱為高通量測序（High-throughputsequencing），是基于PCR和基因芯片發(fā)展而來的DNA測序技術。我們都知道一代測序為合成終止測序，而二代測序開創(chuàng)性的引入了可逆終止末端，從而實現(xiàn)邊合成邊測序（SequencingbySynthesis）。二代測序在DNA復制過程中通過捕捉新添加的堿基所攜帶的特殊標記（一般為熒光分子標記）來確定DNA的序列，現(xiàn)有的技術平臺主要包括Roche的454FLX、Illumina的Miseq/Hiseq等。由于在二代測序中，單個DNA分子必須擴增成由相同DNA組成的基因簇，然后進行同步復制。 邁杰轉(zhuǎn)化醫(yī)學致力于解決創(chuàng)新藥物的研發(fā)痛點及患者的用藥痛點，助力精z準醫(yī)療！

    ***代測序技術1975年由FrederickSanger所提出的鏈終止法以及1977年由WalterGibert所發(fā)明的鏈降解法被稱為***代測序技術。1977年，WalterGilbert和FrederickSanger發(fā)明了***臺測序儀，并應用其測定了***個基因組序列，噬菌體X174，全長5375個堿基。WalterGilbert和FrederickSanger也因在測序技術中的貢獻獲得了1980年諾貝爾化學獎。技術原理目前，基于***代測序技術的測序儀幾乎都是采用Sanger提出的鏈終止法。鏈終止法測序的**原理是ddNTP的2'和3'端都不含羥基，因此在合成核酸鏈的過程中無法形成磷酸二酯鍵，從而導致DNA合成反應中斷。在測定待測核酸片段的序列時，向反應體系中加入一定比例的帶有放射性同位素標記的4種ddNTP，利用DNA聚合酶來延伸結(jié)合在待測核酸模板上的引物，直到摻入一種鏈終止核苷酸為止，**終會得到一組長度各相差一個堿基的鏈終止產(chǎn)物，這些產(chǎn)物可通過高分辨率變性凝膠電泳分離并根據(jù)其長度排序，凝膠處理后可用X-光膠片放射自顯影進行檢測，從而確定目的核酸片段各個位置的堿基。完整的測序過程分為4步：：如要利用Sanger測序方法進行完整基因組的測定，首先要將提取得到的樣品完整DNA打碎，形成DN**段，如只是測定單個目的基因的序列。 邁杰轉(zhuǎn)化醫(yī)學為全球合作伙伴提供包括生物標記物挖掘、藥物靶點驗證、伴隨診斷開發(fā)等一體化解決方案。河北一體化邁杰轉(zhuǎn)化醫(yī)學NGS平臺共同合作

邁杰轉(zhuǎn)化醫(yī)學利用數(shù)字PCR進行低豐度突變研究等；提供循環(huán)腫l瘤DNA檢測，可檢測EGFR、ERBB2等Biomarker。河南多組學邁杰轉(zhuǎn)化醫(yī)學NGS平臺創(chuàng)新服務

    病理切片以及HE染色實驗技術簡介病理切片作為一種實驗技術已廣泛應用于科研、教學、病理檢驗等工作中，有較高的使用價值。實驗的整個流程大致分為以下幾個步驟：組織固定、包埋、切片、脫水、透明、封片、染色。病理切片的質(zhì)量對病理診斷有一定影響。HE染色（蘇木素—伊紅染色）的情況與制作切片的每一個過程都有著緊密的聯(lián)系，包括時間的控制，切片的厚度等，每一個小環(huán)節(jié)都會嚴重影響病灶的呈現(xiàn)。操作流程案例展示石蠟切片機客戶提供1、病理組織切片或組織，注意組織標本保存于固定液中，固定液選用10%福爾馬林或4%多聚甲醛，組織塊大小宜2cm**2、不同組織分開不同容器盛放3、完整的送檢單結(jié)果交付1、完整的試驗流程，操作步驟2、樣本為病理切片，提供染色完成的切片及詳細的解讀報告3、樣本為組織，提供石蠟塊、病理染色切片以及詳細的解讀報告我們的優(yōu)勢技術優(yōu)良的實驗團隊成熟的操作技術一站式綜合服務咨詢與訂購感謝您選擇我們的服務，如果您有任何問題，請聯(lián)系我們，我們將竭誠為您解答和服務。河南多組學邁杰轉(zhuǎn)化醫(yī)學NGS平臺創(chuàng)新服務

邁杰轉(zhuǎn)化醫(yī)學研究（蘇州）有限公司匯集了大量的優(yōu)秀人才，集企業(yè)奇思，創(chuàng)經(jīng)濟奇跡，一群有夢想有朝氣的團隊不斷在前進的道路上開創(chuàng)新天地，繪畫新藍圖，在江蘇省等地區(qū)的醫(yī)藥健康中始終保持良好的信譽，信奉著“爭取每一個客戶不容易，失去每一個用戶很簡單”的理念，市場是企業(yè)的方向，質(zhì)量是企業(yè)的生命，在公司有效方針的領導下，全體上下，團結(jié)一致，共同進退，齊心協(xié)力把各方面工作做得更好，努力開創(chuàng)工作的新局面，公司的新高度，未來邁杰轉(zhuǎn)化醫(yī)學供應和您一起奔向更美好的未來，即使現(xiàn)在有一點小小的成績，也不足以驕傲，過去的種種都已成為昨日我們只有總結(jié)經(jīng)驗，才能繼續(xù)上路，讓我們一起點燃新的希望，放飛新的夢想！