Elisa試劑盒——Elisa實(shí)驗(yàn)常見問題及解決方案

不正常的標(biāo)準(zhǔn)曲線

1  錯(cuò)誤的方法重懸標(biāo)準(zhǔn)品  加入正確量的溶液重懸標(biāo)準(zhǔn)品，重懸充分

2  標(biāo)準(zhǔn)品稀釋錯(cuò)誤  按照說明書要求稀釋標(biāo)準(zhǔn)品

3  標(biāo)準(zhǔn)品污染  使用一次性的滅菌吸頭， 標(biāo)準(zhǔn)品貯存于2-8 ℃

4  錯(cuò)誤的倍比稀釋步驟  按照說明書倍比稀釋標(biāo)準(zhǔn)品

5  波長(zhǎng)選擇錯(cuò)誤 TMB為底物和以O(shè)PD為底物的試劑盒均有使用，而 前者比色波長(zhǎng)為450nm，嘔吐毒素ELISA試劑盒報(bào)價(jià)，后者為492nm。雙波長(zhǎng)比色分析優(yōu)于單波長(zhǎng)。

6  標(biāo)準(zhǔn)品混用  不同批號(hào)試劑勿混用

7  試劑盒在運(yùn)輸途中時(shí)間太長(zhǎng)，溫度太高，標(biāo)準(zhǔn)品失活  盡量縮短運(yùn)輸時(shí)間，夏季應(yīng)放冰塊降溫

8  ELISA未終止而直接檢測(cè)450nm和620nm TMB顯色需終止后檢測(cè)，嘔吐毒素ELISA試劑盒供應(yīng)商，否則會(huì)出現(xiàn)620nm比450nm讀數(shù)高的現(xiàn)象。（數(shù)值仍有梯度規(guī)律）

Elisa試劑盒——Elisa實(shí)驗(yàn)常見問題及解決方案

樣品或標(biāo)準(zhǔn)品OD超出正常范圍

1  錯(cuò)誤的樣品或標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋  完全按照說明書稀釋

2  偶聯(lián)抗體濃度過高  按照說明書調(diào)整到的濃度

3  TMB底物孵育時(shí)間過長(zhǎng)  調(diào)整到合適的孵育時(shí)間

4  樣品或標(biāo)準(zhǔn)品污染  避免污染

5  錯(cuò)誤的孵育時(shí)間或溫度

4  樣品或標(biāo)準(zhǔn)品污染  避免污染

5  錯(cuò)誤的孵育時(shí)間或溫度

ELISA試劑盒的試驗(yàn)原理

試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后，云南嘔吐毒素ELISA試劑盒，加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，嘔吐毒素ELISA試劑盒價(jià)格，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中的濃度呈比例關(guān)系。

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